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zhangjingkai

新虫 (初入文坛)

[求助] 肿瘤细胞体外培养

为何细胞培养两天后就会变浑浊?而且不变黄,显微镜下观察没有污染,细胞在复苏一天过后长得挺好,到第二天培养液就会变浑浊,并且原先贴壁的细胞都飘起来,这到底是为什么呢?急需帮助
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侯伯杨

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhangjingkai(缩++影代发): 金币+1, 谢谢应助 2013-04-29 22:23:54
代谢物多了?或者是不是贴着培养基的壁了?
没个性....
2楼2013-04-29 19:11:00
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geryss

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缩++影: 金币+3, 鼓励新虫应助 2013-04-29 22:23:37
1.若是传代培养,可能是你的细胞本来就不好,消化过度等细胞老久不贴壁,细胞死亡后分泌的一些代谢产物引起更多细胞变圆死亡
2.若是复苏培养的话,那有可能是过4摄氏度时时间过久,细胞受到毒害,或者是复苏后所用培液与冻存前不一致,引起的细胞死亡
未出土时便有节,到凌云处尚虚心
3楼2013-04-29 21:58:58
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geryss

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhangjingkai(侯伯杨代发): 金币+1, 谢谢应助,鼓励 2013-04-29 23:02:11
或者是细胞密度过大或过低,还有就是培液加太多了,造成细胞分泌的生长因子等不够用
未出土时便有节,到凌云处尚虚心
4楼2013-04-29 22:01:00
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhangjingkai(缩++影代发): 金币+1, 鼓励交流 2013-04-30 11:45:21
会不会是细胞密度太高,生长过度融合之后就会飘起来。
实验,实验,还是实验!
5楼2013-04-30 04:29:02
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wangyingfdu

铜虫 (小有名气)


缩++影: 金币+1, 鼓励交流 2013-05-01 17:41:46
感觉描述的像是细胞被污染了,培养液里加抗生素试试看呢?
6楼2013-04-30 23:59:49
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zhangjingkai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by geryss at 2013-04-29 21:58:58
1.若是传代培养,可能是你的细胞本来就不好,消化过度等细胞老久不贴壁,细胞死亡后分泌的一些代谢产物引起更多细胞变圆死亡
2.若是复苏培养的话,那有可能是过4摄氏度时时间过久,细胞受到毒害,或者是复苏后所用 ...

我想是不是胎牛血清有问题?
7楼2013-05-01 10:44:00
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geryss

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangjingkai at 2013-05-01 10:44:00
我想是不是胎牛血清有问题?...

胎牛血清?百分比还是种类?
我养293A也是这种状况,DMEM +10%FBS,老是养不好,找了好多原因就是不行,上述方法我都用遍了,就是养不好,郁闷啊
未出土时便有节,到凌云处尚虚心
8楼2013-05-01 14:19:38
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kinner.huang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhangjingkai(侯伯杨代发): 金币+1, 谢谢应助 2013-05-02 12:26:44
有些细胞系可能需要特殊的原料,建议查下这细胞系从哪个公司购置的,公司推荐的培养基,看下和你现在所用的培养基有什么区别,缺什么东西不
9楼2013-05-02 00:50:28
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zhangjingkai

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by geryss at 2013-05-01 14:19:38
胎牛血清?百分比还是种类?
我养293A也是这种状况,DMEM +10%FBS,老是养不好,找了好多原因就是不行,上述方法我都用遍了,就是养不好,郁闷啊...

不同的厂家卖的同一个牌子的胎牛血清就可能有问题,我的细胞都养两个月了,快郁闷死了,我们还买的新细胞,也不行。
10楼2013-05-02 09:55:42
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