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040205001

新虫 (小有名气)

[求助] 快要疯掉了,这是啥条带呀? 已有4人参与

如图,被PCR折腾的快要疯了,哪位大神解释一下,到底这是什么情况?

快要疯掉了,这是啥条带呀?
20141110.jpg
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-10 18:06:43
你得解释解释具体是什么状况啊,怎么第一泳道看着似乎是maker?
2楼2014-11-10 16:40:26
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小花猫阿

新虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-10 18:06:50
你照胶的时都放反了啊,亲。mark不清晰,然后要测的东西没跑出来
3楼2014-11-10 17:07:35
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你什么情况啊,搞一个白板,不说别的,单看你的Marker,即使你能P出来目的带,就这块胶来看,也不会有显示的,请重新做一块,不管目的条带有没有,最起码保证Marker清晰可见,这是最起码的科学素养。而且你们那里拍照都是头朝下拍的吗,...第一次做胶啊
4楼2014-11-11 09:36:13
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040205001

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 去哪里看海 at 2014-11-10 16:40:26
你得解释解释具体是什么状况啊,怎么第一泳道看着似乎是maker?

最近在筛选合适的微卫星引物,引物序列是在别人的文献中找到的。是的,第一泳道是marker,胶是琼脂糖凝胶,扩增的是大概200多bp的片段,P了好多次都出不来条带,不知道怎么回事,感觉Marker都不清楚,而且也没有分开似得,不知道该怎么办了。由于DNA的纯化是从粪便中提取的,所以不知道是因为模板太低还是扩增的温度不对,真的很烦。
5楼2014-11-18 12:50:31
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040205001

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yabxxh at 2014-11-11 09:36:13
你什么情况啊,搞一个白板,不说别的,单看你的Marker,即使你能P出来目的带,就这块胶来看,也不会有显示的,请重新做一块,不管目的条带有没有,最起码保证Marker清晰可见,这是最起码的科学素养。而且你们那里拍 ...

最近在筛选合适的微卫星引物,引物序列是在别人的文献中找到的。是的,第一泳道是marker,胶是琼脂糖凝胶,扩增的是大概200多bp的片段,P了好多次都出不来条带,不知道怎么回事,感觉Marker都不清楚,而且也没有分开似得,不知道该怎么办了。由于DNA的纯化是从粪便中提取的,所以不知道是因为模板太低还是扩增的温度不对,真的很烦。
您说的就这块胶看,也不会有显示是什么意思?胶做的不行?我是第一次做分子方面的东西,师兄师姐又没有做的,老师也不会这方面的东西,愁。
6楼2014-11-18 12:58:23
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040205001

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 去哪里看海 at 2014-11-10 16:40:26
你得解释解释具体是什么状况啊,怎么第一泳道看着似乎是maker?

最近在筛选合适的微卫星引物,引物序列是在别人的文献中找到的。是的,第一泳道是marker,胶是琼脂糖凝胶,扩增的是大概200多bp的片段,P了好多次都出不来条带,不知道怎么回事,感觉Marker都不清楚,而且也没有分开似得,不知道该怎么办了。由于DNA的纯化是从粪便中提取的,所以不知道是因为模板太低还是扩增的温度不对,真的很烦。唉。
7楼2014-11-18 12:58:45
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chenaihuatc

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你这块胶质量很差呀,看起来不均匀的样子,连marker都跑不好。
建议重新配胶吧,多配几个浓度,1.0%,1.5%,2.0%都试试,胶溶后拿出来混匀再放进去煮沸一次,胶槽洗净擦干。至少要先保证把marker跑出来吧!
8楼2014-11-18 20:07:27
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chenaihuatc

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

还有,胶不要太厚了,电压不能太高,胶发热也会导致这种状况。
9楼2014-11-18 20:11:52
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wxk19960113

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

marker条带都没跑好,可能是胶浓度问题,建议用1%或1.2%,不行多做几个浓度的看看。

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-11-19 01:17:22
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