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061719

新虫 (小有名气)

[求助] 求助,冰冻组织是否可以用流式检测细胞周期?已有2人参与

如题,我想要吧-80保存的组织,经过酶消化处理成单细胞,然后用流式检测处于各个细胞分裂时期的细胞总量,不知道是否可行?用流式可以检测吗?
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needle_ld

至尊木虫 (正式写手)

木虫学者

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
061719: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-04 16:39:17
基本行不通。
不知道是什么组织?-80度保存组织的过程中,因为没有相应的抗冰晶形成和溶质性损害的方法,细胞基本上都死了。正常组织结构都没法保存了。
不用酶消化,都是一笔糊涂账。再谈酶消化成单细胞,还有可能吗?
就更不用提做流式了。
平等观诸法,悲心救世间。解彼真实性,得佛智慧光。
2楼2014-11-04 10:35:56
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danchenanhai

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
061719: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-11-06 11:17:30
很少见用组织来测周期的。既然问题提出来了,就分析一下吧:
1)冻存,冻存组织的条件能够保证细胞结构不被破坏吗?培养细胞当然可以-80或液氮冻存,周期固定是在-20的70%乙醇中。与之相比冻存细胞取出来消化后结构如何,你可以先做一下,在显微镜下观察,也可以借助染色确保细胞结构完整和形态基本正常。
2)消化,组织细胞会比较粘稠,消化后需要用尼龙膜过滤。
3)固定,前面都没问题的话,组织细胞应该也需要固定。
前面一切顺利的话,后续操作与培养细胞相同。考虑不周的地方请补充。
3楼2014-11-06 10:16:56
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