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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 关于发酵罐培养基灭菌问题
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qcq019

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xuzhide at 2014-11-03 09:56:47
灭菌时间和原料的新鲜程度。

谢谢。可能是这个原因，这次对原料进行了处理，灭菌时间也相应加长，目前培养12h还没有问题

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发酵
11楼2014-11-03 10:21:29
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boysil

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大概的污染时间是什么时候？
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12楼2014-11-03 11:09:14
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qcq019

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by boysil at 2014-11-03 11:09:14
大概的污染时间是什么时候？

以温度降至30℃开始计算，染菌时间分别为0h，24h，72h

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发酵
13楼2014-11-03 11:14:05
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boysil

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by qcq019 at 2014-11-03 11:14:05
以温度降至30℃开始计算，染菌时间分别为0h，24h，72h
...

0h：可能没有灭菌好、接种的时候操作不当、或者种子有问题
24h：可能没有灭菌好、中途操作不当
72h：可能中途操作不当
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14楼2014-11-03 11:22:08
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愤怒的家雀

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by qcq019 at 2014-11-03 10:13:18
谢谢。在上次染菌后，减少了培养基装量，实消时三路蒸汽开度较以往都大，培养基剧烈翻滚，但是降温到30℃时取样仍然染菌。空气滤芯新更换，事后检查没有发现脓疱，发酵罐气密性良好。
...

有没有做渗漏测试？
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15楼2014-11-03 12:02:02
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树2979

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by qcq019 at 2014-11-03 10:13:18
谢谢。在上次染菌后，减少了培养基装量，实消时三路蒸汽开度较以往都大，培养基剧烈翻滚，但是降温到30℃时取样仍然染菌。空气滤芯新更换，事后检查没有发现脓疱，发酵罐气密性良好。
...

灭完菌在降温的过程中不是要保持一定的罐压么？最好能保持在0.03~0.05Mpa之间，待降温至37摄氏度以下取无菌样做平板涂布和液体培养，看看情况如何！同时，建议对空间地板以及钢平台等每天固定时间不同消毒液进行消毒，创造好环境

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16楼2014-11-03 15:52:54
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qcq019

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 树2979 at 2014-11-03 15:52:54
灭完菌在降温的过程中不是要保持一定的罐压么？最好能保持在0.03~0.05Mpa之间，待降温至37摄氏度以下取无菌样做平板涂布和液体培养，看看情况如何！同时，建议对空间地板以及钢平台等每天固定时间不同消毒液进行消 ...

降温及培养过程中没有罐压跌零的情况，在排除其他可能的情况下，目前最可疑的是死角及实消不彻底。根据降完温后取样涂平板染菌的情况，我更怀疑是实消不彻底。现在正在空培，36h正常，感觉到希望了！

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发酵
17楼2014-11-03 17:45:39
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qcq019

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 愤怒的家雀 at 2014-11-03 12:02:02
有没有做渗漏测试？...

做过了，关键部位不存在渗漏，可能还是实消的问题

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发酵
18楼2014-11-03 17:47:24
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bigboy2050

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
18楼: Originally posted by qcq019 at 2014-11-03 17:47:24
做过了，关键部位不存在渗漏，可能还是实消的问题
...

实消时间提到40min，有些芽孢菌121度30min灭不彻底；另外，看一下溶氧电极膜片是否渗漏；还有就是仔细排查可能的死角。3000L罐应该好处理。
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职业无分贵贱，做事要有格调
19楼2014-11-03 20:19:27
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tiu007

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议查看一下你发酵罐的压力表是否正常！
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20楼2014-11-04 13:28:01
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