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新虫 (初入文坛)

[求助] 关于液相色谱测定波长的问题 已有4人参与

1.我在紫外跟光光度计上扫得全谱,确定了我测定物质的最大吸收峰。请问我测得的这个吸收峰能够应用在高效液相色谱紫外检测上吗?
如果不能,请问用安捷伦1200s的液相色谱仪器怎么测定最大吸收波长?能扫全谱吗?

2.我今天用这个波长在液相色谱机器上检测,完全没有吸收峰,重新配溶液也是,用的波长是买标准品的检测报告上的.
后来我用甲苯和苯测柱子柱效是正常的,刚买的新柱子,柱子应该没有问题 ,这可能是什么原因呀?

刚开始做液相色谱,请指教
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新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by klicking at 2014-10-31 21:29:05
1:可以,仪器如果带有DAD或PDA检测器可以全扫光谱的;
2:推测是流动相比例不合适,可能没有出峰,可以尝试提高有机相比例试试。

仪器带有DAD检测器,请问扫全谱的话具体怎么操作呀?

流动相我用的是梯度流动相,乙腈比例从9%升到34%,之前用PLUS C18的柱子可以做检测,现在用的XDB-C18反而测不出来了,
5楼2014-11-04 12:27:57
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新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by 芒果布丁牛奶 at 2014-10-31 21:58:59
也可能是进样的浓度或者体积太小造成的。也可以把标品再做一次全扫确定最大吸收波长。还有,你确定你的检测器是开着的吗

开啦~样品的前10分钟和后十分钟都是有峰的,不过是杂峰。。

进样体积是20ul,浓度最高用的200ug/ml也没有峰,但是我们老板之前用这个柱子测的浓度比我的小都做出来了。。
6楼2014-11-04 12:29:40
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新虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by smart_phenol at 2014-11-01 10:31:11
要考虑一下你的物质使用现在的柱子进行测试是否合适哦。

用的C18色谱柱,标准品是多肽.
7楼2014-11-04 12:31:29
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