24小时热门版块排行榜    

查看: 3781  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 用BamHI和HindIII双酶切pet-28a质粒,可是什么条带都没有事怎么回事! 已有4人参与

用BamHI和HindIII双酶切pet-28a质粒,4个小时,用的是通用buffer K,可是电泳什么条带都没有,要是没切开的话是不是也应该有三条带啊?其他maker和未酶切的pet-28a质粒都跑出来了,单酶切同时跑电泳也是什么都没有!还请前辈指教!已经做了两回了!请问需要分别切吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圆yy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-31 23:13:49
这个是没有道理的,你的对照是同一个提取的质粒吗?你说质粒不酶切就可以跑出条带,酶切就跑不出来????操作严格或者规范一点,祝你好运。
4楼2014-10-31 15:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

姣妹崽

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-31 23:13:44
我觉得首先确定你的体系没出错,然后考虑你的酶有没有过期失活什么的?
2楼2014-10-31 14:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

well_想太多

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 姣妹崽 at 2014-10-31 14:23:11
我觉得首先确定你的体系没出错,然后考虑你的酶有没有过期失活什么的?

酶是没问题的,切别的载体时成功的,体系是用25微升的,载体时15微升,其他酶是各1微升.buffer是2.5微升.
3楼2014-10-31 14:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinshengfang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-31 23:13:56
单酶切都没有了,说明两个酶都把质粒切掉了,那分步切就没有意义。我觉得可能是酶或者缓冲液被污染了
生物催化
5楼2014-10-31 16:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 5/250 2026-08-24 21:51 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +6 scalable 2026-08-24 6/300 2026-08-24 20:28 by 苦寒来香
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见