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friedy

金虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母发酵液上清浓缩后测出蛋白浓度了,但跑不出来胶已有1人参与

毕赤酵母发酵上清浓缩后BCA测浓度,约300μg/ml,但为什么SDS胶却跑不出来,什么有没有呢?
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林家女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑电泳前是否进行了加热变性这一步骤?
2楼2014-10-29 15:06:49
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friedy

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 林家女孩 at 2014-10-29 15:06:49
跑电泳前是否进行了加热变性这一步骤?

100℃煮了5分钟。
3楼2014-10-29 20:33:41
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yuyxwr

新虫 (初入文坛)

可能的原因:
1.目的蛋白的pI是多少?,如果是碱性蛋白,可能会反方向移动。
2.凝胶下方的胶条没有取下来,内外液相没有联通。
4楼2014-10-29 21:06:26
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friedy

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyxwr at 2014-10-29 21:06:26
可能的原因:
1.目的蛋白的pI是多少?,如果是碱性蛋白,可能会反方向移动。
2.凝胶下方的胶条没有取下来,内外液相没有联通。

谢谢!胶条取下来了。
等电点是10左右,追问一个比较弱的问题,碱性蛋白,反向移动是什么意思?跑不下去么?我该怎么改进呢?辛苦了
5楼2014-10-29 21:55:47
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