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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 毕赤酵母发酵液上清浓缩后测出蛋白浓度了，但跑不出来胶
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friedy

金虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母发酵液上清浓缩后测出蛋白浓度了，但跑不出来胶 已有1人参与

毕赤酵母发酵上清浓缩后BCA测浓度，约300μg/ml，但为什么SDS胶却跑不出来，什么有没有呢？
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1楼 2014-10-29 14:53:54
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friedy

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyxwr at 2014-10-29 21:06:26
可能的原因：
1.目的蛋白的pI是多少？，如果是碱性蛋白，可能会反方向移动。
2.凝胶下方的胶条没有取下来，内外液相没有联通。

谢谢！胶条取下来了。
等电点是10左右，追问一个比较弱的问题，碱性蛋白，反向移动是什么意思？跑不下去么？我该怎么改进呢？辛苦了
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5楼2014-10-29 21:55:47
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林家女孩

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑电泳前是否进行了加热变性这一步骤？
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2楼2014-10-29 15:06:49
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friedy

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 林家女孩 at 2014-10-29 15:06:49
跑电泳前是否进行了加热变性这一步骤？

100℃煮了5分钟。
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3楼2014-10-29 20:33:41
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yuyxwr

新虫 (初入文坛)
可能的原因：
1.目的蛋白的pI是多少？，如果是碱性蛋白，可能会反方向移动。
2.凝胶下方的胶条没有取下来，内外液相没有联通。
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4楼2014-10-29 21:06:26
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