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孙倩2012

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!二氧化硅微球表面修饰氨基的问题 已有2人参与

二氧化硅微球表面修饰氨基,有无用这样的方法,20ml 微球以超纯水为溶剂加1.4ml 的冰乙酸再加入200 ul 的APTES
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wangyang7887

至尊木虫 (知名作家)

孤独的牧羊人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将二氧化硅分散在异丙醇中,加入APTES,80度回流3个小时即可。你所说的方法好像没见过
菩提本无树,明镜亦非台。本来无一物,何处惹尘埃?世曰:一花一世界;佛曰:一叶一菩提。
2楼2014-10-27 15:51:53
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孙倩2012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangyang7887 at 2014-10-27 15:51:53
将二氧化硅分散在异丙醇中,加入APTES,80度回流3个小时即可。你所说的方法好像没见过

我修饰完氨基后测了ZETA 电位,裸球为-28,修饰完氨基后为+49,这是否一定说明氨基修饰上了呢
3楼2014-10-28 10:40:06
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wangyang7887

至尊木虫 (知名作家)

孤独的牧羊人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 孙倩2012 at 2014-10-28 10:40:06
我修饰完氨基后测了ZETA 电位,裸球为-28,修饰完氨基后为+49,这是否一定说明氨基修饰上了呢...

恩 这应该能说明表面氨基化了
菩提本无树,明镜亦非台。本来无一物,何处惹尘埃?世曰:一花一世界;佛曰:一叶一菩提。
4楼2014-10-28 14:01:45
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孙倩2012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyang7887 at 2014-10-28 14:01:45
恩 这应该能说明表面氨基化了...

我修饰完氨基然后修饰羧基,ZETA电位由正变为负,这也就说明羧基修饰上了,然后我用 EDC/NHS 活化羧基,连接蛋白,总是失败,不知道是怎么回事啊,请问活化羧基后,微球的状态会发生变化吗?
5楼2014-10-29 10:24:48
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scqing

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by 孙倩2012 at 2014-10-29 10:24:48
我修饰完氨基然后修饰羧基,ZETA电位由正变为负,这也就说明羧基修饰上了,然后我用 EDC/NHS 活化羧基,连接蛋白,总是失败,不知道是怎么回事啊,请问活化羧基后,微球的状态会发生变化吗?...

你的这个方法是比较经典的,但是操作比较复杂,我做了另外一种修饰的磁珠,在PBS缓冲液中常温孵育2小时,就可以完成蛋白/抗体的共价键链接,你可以到群106 266 865找群主,或者找“大师兄”要20mg试试,20mg可以接200-500微克蛋白
6楼2014-10-29 11:45:21
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孙倩2012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by scqing at 2014-10-29 11:45:21
你的这个方法是比较经典的,但是操作比较复杂,我做了另外一种修饰的磁珠,在PBS缓冲液中常温孵育2小时,就可以完成蛋白/抗体的共价键链接,你可以到群106 266 865找群主,或者找“大师兄”要20mg试试,20mg可以接 ...

好的谢谢,其实我还是比较想搞清楚我试验失败在哪个环节,后来我去做了紫外,发现蛋白没有修饰上,不知道是氨基羧基修饰出现问题还是活化出现问题
7楼2014-10-29 13:49:50
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Xx虫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangyang7887 at 2014-10-27 15:51:53
将二氧化硅分散在异丙醇中,加入APTES,80度回流3个小时即可。你所说的方法好像没见过

您好,师兄/师姐有这种方法的文献吗,可不可以发我一份?我只找到甲苯回流法,感觉您的方法更为低毒,高效,可以的话请发到476010807@qq.com
8楼2017-03-03 14:49:32
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2016考研人在

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangyang7887 at 2014-10-27 15:51:53
将二氧化硅分散在异丙醇中,加入APTES,80度回流3个小时即可。你所说的方法好像没见过

能不能说一下您的二氧化硅与APTES摩尔比呢
9楼2018-05-07 10:33:29
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10楼2021-01-21 01:05:52
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