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奇怪人生123银虫 (小有名气)
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[求助]
构建丝状真菌转化子，产生一个没有终止子的基因，请问它会如何转录和表达？求大神！ 已有1人参与
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我一直在做灰绿曲霉的相关研究，为了将我的目的蛋白与GFP融合表达，所以构建一个叫做pXL-zeo的质粒，通过单交换获得转化子，见我的附件图。 最上方的是我构建的质粒，中间写有“WT”的是野生株的基因组，最下方“NEW TYPE”指得到的转化子的基因型。 对于转化子的基因型，在前面的部位产生了一个有启动子+目的基因完整ORF（但没有终止子）的“基因”，紧跟其后的是构建质粒上的一部分序列，在后面的一坨就是抗性基因和我想要的表达盒。 那么问题来了！前方“启动子+目的基因完整ORF”会如何转录及表达呢？希望各位大神能稍详尽的分析，最好能有一些资料。 PS：我对目的基因和gfp做了Real-time PCR，得到目的基因veA表达量非常高，gfp表达量相对低，但是通过转化子的表型分析，该转化子更像是目的基因功能缺失的菌株。  单交换.png |
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奇怪人生123: 金币+5, ★有帮助 2014-10-27 12:12:09
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2楼2014-10-25 10:53:23
奇怪人生123
银虫 (小有名气)
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- 专业: 临床分子生物学检验
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