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分析-Legion新虫 (小有名气)
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SYBR Green I 会与ExoIII 之间会相互影响吗
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1.在缓冲液中加入SYBR Green I 可以检测到较高的荧光强度（1379 au.）;当在缓冲液中加入ExoIII，水浴37℃后再加入SYBR Green I 十分钟后检测荧光强度时只有198.4.这可以说明ExoIII会和SYBR Green I反应吗？ 2..我在加入Exo III 37摄氏度培育半个小时后 又将这个酶灭活了20min ，最后加入染料SG I，十分钟后检测荧光，荧光值还是很低，只有100多。应该怎么样才可以降低Exo III对SYBR Green I 的影响呢？ |
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2楼2014-10-17 22:27:00
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我做的是让SYBR Green I 嵌入G四联体里面发光，实验证明G四联体越多，加入相同量的SYBR Green I 得到的荧光强度也是越大的。 另外，我做的另一个实验：在形成G四联体后（G四浓度不断增加）加入相同量的Exo III 培育（目的是想证明Exo III不能水解G四联体），再加入相同量的SYBR Green I 培育就不会有逐渐增强的荧光强度，实验现象是在低浓度范围荧光强度都很低（接近于水平线），在中间浓度时（5mM）荧光强度达到最高值，然后随着G四浓度的增大，荧光强度是不断降低的。 这个实验我已经重复了很多次，每次都是这种现象，这是什么原因呢，是因为Exo III可能已经剪切了G四联体吗？ |
3楼2014-10-18 09:54:01
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