| 查看: 1633 | 回复: 9 | |||
syn1985木虫 (正式写手)
|
[求助]
要表达的蛋白 基因序列扩出两个长度的正确片段 给跪了 求问各位大神 已有2人参与
|
|
小虫是做丝状真菌基因表达的，前一段时间做了个基因，用一对引物从mRNA中扩增出来了两个片段A和B，就全部连接到T载体上送去测序，本想着有一个肯定是错配，结果测序结果发现A和B都是目的片段，引物都可以比对上，只是A比B少剪切了一段序列，长度在200bp（在5‘端），我将这两段序列用软件翻译了一下，编码框不一样：A是+3 B是+1，两个编码的蛋白只在N端有20个AA不一样，其他都一样，用NCBI找了保守区也是相同的。 我现在不知道应该尝试表达哪一段序列，这两段不太一样的序列有说明了什么 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有95人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白与DNA解交联问题
已经有3人回复
- 同一个基因片段连到两个不同载体，序列就不一样了？
已经有10人回复
- 求问全基因组学和宏基因组学有什么区别
已经有3人回复
- 求助各位虫虫，有没有人知道如何从蛋白质氨基酸序列来推测基因序列的研究手段
已经有8人回复
- 如何避免单引物扩增，扩出的目的片段为什么都是单引物扩增
已经有4人回复
- 亚硝酸盐氧化还原酶基因nxrA怎么做PCR才能P出来啊？
已经有7人回复
- 两个基因融合不起来
已经有13人回复
- 【求助/交流】列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的两种原因
已经有5人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+1, 谢谢 2014-10-04 15:17:14
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:01:41
感谢参与，应助指数 +1
syn1985: 金币+1, 谢谢 2014-10-04 15:17:14
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-04 22:01:41
| 我做植物基因克隆也碰过类似情况，可能原因是 一个基因簇或者基因家族里的两个基因在DNA序列上串联排列，并且高度同源，所以你用一对引物，有概率把两个都克隆出来了，这种情况就是一个基因家族的两个成员。要么就是生物中基因复制现象，就是一个基因在基因组中发生复制扩张，那么两个就是一个基因。还有情况就是错配了。 你可以提高温度看看结果如何，然后把其他真菌中克隆的类似基因与之对比，看看通过保守结构域分析 能不能区别两者差异 |
2楼2014-10-04 15:10:19
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2014-10-04 15:14:35
liuderong
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 310 (大学生)
- 金币: 8202.1
- 红花: 31
- 帖子: 582
- 在线: 142.1小时
- 虫号: 1882145
- 注册: 2012-07-07
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2014-10-04 15:49:56
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
5楼2014-10-04 16:29:33
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
6楼2014-10-04 16:35:53
liuderong
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 310 (大学生)
- 金币: 8202.1
- 红花: 31
- 帖子: 582
- 在线: 142.1小时
- 虫号: 1882145
- 注册: 2012-07-07
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2014-10-04 18:41:34
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
8楼2014-10-04 22:24:53
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
9楼2014-10-04 22:26:15
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
10楼2014-10-06 11:21:25
