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luluze

新虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见光分光测定 已有1人参与

我想确定某种物质的最大吸收波长 及在这个波长下的吸光度,现在测得情况是:1. 全波段扫描的吸光度在可见光区的吸光度-波长曲线是一条直线,在420nm处吸光度最大。2.分别选择几个波长测得数据如下,波长:吸光度;420:0.049, 400:0.058  370:0.085  250:0.121  240:0.272  220:0.401,这组数据和全波段扫描的不一样啊?是怎么回事?还有一个问题:纯化水第一次扫描时,吸光度为0;后面测得时候,就有吸光度,而且值相差多,不知怎么回事? 第二个问题:用的是配对的比色皿,为什么用同样的空白水,吸光度相差大道0.5?请教哪位高手解答一下这些问题啊,同时指导一下紫外可见光分光光度法确定吸光度和最大波长的方法啊,很着急,公司设备做清洁验证,很着急、、、、小女子先谢谢了
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liwentao2010

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山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+3, 辛苦了 2014-09-27 10:01:56
首先,楼主先扫描基线,看看是否平整,若是水平,说明仪器稳定,然后再选择标准样扫描全波长(比如200-600nm),选择最大吸收波长,最后再在最大吸收波长下看看其吸光度如何,一样说明仪器,操作基本没有问题。根据楼主的实验数据,有可能仪器不太稳定或样品中组分复杂。
加油!
2楼2014-09-26 17:53:56
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luluze

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-09-26 17:53:56
首先,楼主先扫描基线,看看是否平整,若是水平,说明仪器稳定,然后再选择标准样扫描全波长(比如200-600nm),选择最大吸收波长,最后再在最大吸收波长下看看其吸光度如何,一样说明仪器,操作基本没有问题。根据楼 ...

纯化水第一次扫描时,吸光度为0;后面测得时候,就有吸光度,而且值相差多,不知怎么回事?
3楼2014-09-28 08:55:05
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