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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 紫外可见分光光度计测量步骤是否正确
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wocala1234

银虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见分光光度计测量步骤是否正确 已有2人参与

以下是我做的紫外光谱步骤：

1.标准曲线：
溶液：乙醇、药物（需测物质，波长263nm）、生物液（水、氯化钠等）
空白液：乙醇、生物液    作为基线
绘制标准曲线y=ax+b

2.测量
溶液：药物、生物液、PVA（波长690nm）、甘油（波长340nm）
空白液：生物液    作为基线
这样做是否正确？
第二步测量完，直接把吸光度带入y=ax+b中得出浓度，这样正确吗？
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1楼 2014-05-21 09:55:53
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确保做标曲的条件和样品的条件是一致的。波长这些都要一样，不然你做的标曲也没有什么意义啊。
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2楼2014-05-21 10:03:16
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wocala1234

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 10:03:16
确保做标曲的条件和样品的条件是一致的。波长这些都要一样，不然你做的标曲也没有什么意义啊。

我写出pva和甘油的波长只是确保他们不会影响药物的峰。实验是为了测量药物的含量。
测量出的数据在263nm处吸光度只有0.14~0.26，这样误差会不会比较大，需要增大溶液浓度吗？
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3楼2014-05-21 10:11:49
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放
引用回帖:
3楼: Originally posted by wocala1234 at 2014-05-21 10:11:49
我写出pva和甘油的波长只是确保他们不会影响药物的峰。实验是为了测量药物的含量。
测量出的数据在263nm处吸光度只有0.14~0.26，这样误差会不会比较大，需要增大溶液浓度吗？...

是标曲还是样品的吸光度？稍微加大一下浓度。
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4楼2014-05-21 10:17:09
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wocala1234

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 10:17:09
是标曲还是样品的吸光度？稍微加大一下浓度。...

标准曲线吸光度0.07~0.68
样品吸光度0.15~0.26
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5楼2014-05-21 10:26:09
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放
引用回帖:
5楼: Originally posted by wocala1234 at 2014-05-21 10:26:09
标准曲线吸光度0.07~0.68
样品吸光度0.15~0.26...

那还可以的。标曲能用，样品浓度也在那个范围。
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6楼2014-05-21 10:28:24
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wocala1234

银虫 (小有名气)
内容已删除
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7楼2014-05-21 10:31:13
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放
★ ★
crity328: 金币+2, 感谢交流，欢迎常来分析版~专家辛苦了~谢谢耐心解答~ 2014-05-21 14:38:10
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wocala1234
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8楼2014-05-21 12:19:34
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wocala1234

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 12:19:34
你测量的时候没有目标物的波长吗？药学的这些我不太懂。...

有，就是263.6nm……如果实验步骤没有问题的话就得考虑其他可能原因了。
总之，谢谢你拉！
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9楼2014-05-21 15:03:26
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qiyushzu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不太懂你测的药品，一般测样的步骤:1.全波长扫描确定最大吸收波长，在此波长下做空白和底液吸光度，确保无吸收。
2.确定配液用量条件，溶剂、缓冲液、pH、、、等
3.选好空白测标准系列，吸光度小可增大浓度或使用更厚的比色皿
4、现在仪器吸光度超出0.2~0.8准确度也可以，可以做下检出限和线性范围
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10楼2014-05-21 17:33:34
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