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wocala1234

银虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见分光光度计测量步骤是否正确 已有2人参与

以下是我做的紫外光谱步骤:

1.标准曲线:
溶液:乙醇、药物(需测物质,波长263nm)、生物液(水、氯化钠等)
空白液:乙醇、生物液    作为基线
绘制标准曲线y=ax+b

2.测量
溶液:药物、生物液、PVA(波长690nm)、甘油(波长340nm)
空白液:生物液    作为基线
这样做是否正确?
第二步测量完,直接把吸光度带入y=ax+b中得出浓度,这样正确吗?
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确保做标曲的条件和样品的条件是一致的。波长这些都要一样,不然你做的标曲也没有什么意义啊。
阳光打在你的脸上,温暖留在我们心头
2楼2014-05-21 10:03:16
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wocala1234

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 10:03:16
确保做标曲的条件和样品的条件是一致的。波长这些都要一样,不然你做的标曲也没有什么意义啊。

我写出pva和甘油的波长只是确保他们不会影响药物的峰。实验是为了测量药物的含量。
测量出的数据在263nm处吸光度只有0.14~0.26,这样误差会不会比较大,需要增大溶液浓度吗?
3楼2014-05-21 10:11:49
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

引用回帖:
3楼: Originally posted by wocala1234 at 2014-05-21 10:11:49
我写出pva和甘油的波长只是确保他们不会影响药物的峰。实验是为了测量药物的含量。
测量出的数据在263nm处吸光度只有0.14~0.26,这样误差会不会比较大,需要增大溶液浓度吗?...

是标曲还是样品的吸光度?稍微加大一下浓度。
阳光打在你的脸上,温暖留在我们心头
4楼2014-05-21 10:17:09
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wocala1234

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 10:17:09
是标曲还是样品的吸光度?稍微加大一下浓度。...

标准曲线吸光度0.07~0.68
样品吸光度0.15~0.26
5楼2014-05-21 10:26:09
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

引用回帖:
5楼: Originally posted by wocala1234 at 2014-05-21 10:26:09
标准曲线吸光度0.07~0.68
样品吸光度0.15~0.26...

那还可以的。标曲能用,样品浓度也在那个范围。
阳光打在你的脸上,温暖留在我们心头
6楼2014-05-21 10:28:24
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wocala1234

银虫 (小有名气)

内容已删除
7楼2014-05-21 10:31:13
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

★ ★
crity328: 金币+2, 感谢交流,欢迎常来分析版~专家辛苦了~谢谢耐心解答~ 2014-05-21 14:38:10
内容已删除

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

阳光打在你的脸上,温暖留在我们心头
8楼2014-05-21 12:19:34
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wocala1234

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-05-21 12:19:34
你测量的时候没有目标物的波长吗?药学的这些我不太懂。...

有,就是263.6nm……如果实验步骤没有问题的话就得考虑其他可能原因了。
总之,谢谢你拉!
9楼2014-05-21 15:03:26
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qiyushzu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不太懂你测的药品,一般测样的步骤:1.全波长扫描确定最大吸收波长,在此波长下做空白和底液吸光度,确保无吸收。
2.确定配液用量条件,溶剂、缓冲液、pH、、、等
3.选好空白测标准系列,吸光度小可增大浓度或使用更厚的比色皿
4、现在仪器吸光度超出0.2~0.8准确度也可以,可以做下检出限和线性范围
10楼2014-05-21 17:33:34
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