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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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茜草科

新虫 (小有名气)

[求助] 怎么分析尿样 已有2人参与

课题是肝毒性的研究，动物预试已经结束，现在准备做分析，遇到很多困难，希望大家多多指教！！！
      首先所测成分含量较低，怎么富集尿样呢，
      有文献是用固相小柱，有的浓缩，有的又说尿样不能浓缩会损伤柱子，得稀释。
      另外用甲醇处理尿样是除盐吗？有的用甲酸水稀释。目的是什么呢？
   
      检测是不是必须得用质谱才行？液相的响应有点低。
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1楼 2014-09-25 09:16:00
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用固相萃取富集，也可以用液液萃取浓缩富集，甲醇的作用是沉淀尿液中的蛋白。
如果用固相萃取和液液萃取就不需要再沉淀蛋白了。
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2楼2014-09-25 09:22:28
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茜草科

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-09-25 09:22:28
可以用固相萃取富集，也可以用液液萃取浓缩富集，甲醇的作用是沉淀尿液中的蛋白。
如果用固相萃取和液液萃取就不需要再沉淀蛋白了。

谢谢你 尿里面蛋白很少吧？ 我还在想是不是除盐

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-09-25 12:07:09
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 茜草科 at 2014-09-25 12:07:09
谢谢你 尿里面蛋白很少吧？ 我还在想是不是除盐
...

蛋白不少，你用乙腈沉淀离心一下就能看到
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4楼2014-09-25 14:22:48
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破土草儿

木虫 (正式写手)
如果测量的成分多，结构差异大，用液液萃取不合适。用1ml固相萃取柱把！前提每个时间点的尿液量有500,600微升尿液。上柱子前，用一倍或者两倍的水稀释一下！帖子中提到的甲醇稀释，大部分还是为了除盐。
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5楼2014-09-25 14:42:54
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茜草科

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-09-25 14:22:48
蛋白不少，你用乙腈沉淀离心一下就能看到...

好的 谢谢！
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6楼2014-09-25 19:37:13
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茜草科

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 破土草儿 at 2014-09-25 14:42:54
如果测量的成分多，结构差异大，用液液萃取不合适。用1ml固相萃取柱把！前提每个时间点的尿液量有500,600微升尿液。上柱子前，用一倍或者两倍的水稀释一下！帖子中提到的甲醇稀释，大部分还是为了除盐。

好的！谢谢师兄啦
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7楼2014-09-25 19:40:21
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foot_print

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
茜草科: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-09-27 10:38:09
1. 测定成分虽然含量低，但是LC-MS的灵敏度一般是够的；
2. 肝毒性研究建议做相应的生化药理指标，连同肾一起做；
3.如果测定的化合物极性不是太大，可以考虑液液萃取，用乙酸乙酯正丁醇等萃取都是可行的方法，萃取后用适当的溶剂复溶，固相萃取小柱一般都是成本比较高；
4. 萃取时候因尿样中基质复杂，可加入适当的缓冲盐或易挥发的酸碱处理
5. 如果要测的化合物找不到，可以考虑测定其代谢产物；
6. 尿样收集容易受到污染等因素的影响，请务必注意；
7. 尿样一般不能直接进样，其中具体成分自己查
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whereyouwanttogo!
8楼2014-09-26 15:28:06
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