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dapaodiao

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有方法使得氨基酸翻译的1号位不是MET,但是不能用酶切的方法。 已有1人参与

现在想表达一个酶,包好大小两个亚基,大亚基1号位的ser是活性中心,现在想分开表达大小亚基,但是不知道如何能够使得大亚基1号是ser而非Met。求大神指教。
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dapaodiao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 御猫九首 at 2014-09-17 21:48:44
met的问题用信号肽解决

这个好像可以一试,请问在大肠杆菌中有什么比较好的或者常用的信号肽推荐吗?
6楼2014-09-19 09:45:53
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查看全部 6 个回答

dapaodiao

新虫 (初入文坛)

本来的我酶是包含a和b亚基,在翻译成多肽后自动切去信号肽、a/b间的间隔肽,然后组装成成熟的酶。现在遇到的问题就是发现间隔肽切不开,想在胞内分开表达a和b,这样的话相当于是表达两个独立的多肽,b要翻译的话就需要一个ATG,所以需要人为添加ATG使它翻译。但是b本来的一号位是ser,且是严格保守的,现在就变成1号位是met。有什么办法使得表达时候直接是ser。不想要纯化酶切这种方法。
2楼2014-09-17 21:35:37
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御猫九首

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dapaodiao: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-19 09:59:31
做一个多顺反子 一条mRNA 两个核糖体识别位点 两个uaa
好好睡觉,认真学习
3楼2014-09-17 21:47:44
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御猫九首

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-14 13:18:16
gyesang: 回帖置顶 2014-10-14 13:18:26
met的问题用信号肽解决
好好睡觉,认真学习
4楼2014-09-17 21:48:44
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