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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有没有方法使得氨基酸翻译的1号位不是MET，但是不能用酶切的方法。
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dapaodiao

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有方法使得氨基酸翻译的1号位不是MET，但是不能用酶切的方法。已有1人参与

现在想表达一个酶，包好大小两个亚基，大亚基1号位的ser是活性中心，现在想分开表达大小亚基，但是不知道如何能够使得大亚基1号是ser而非Met。求大神指教。
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1楼2014-09-17 21:19:47
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dapaodiao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 御猫九首 at 2014-09-17 21:47:44
做一个多顺反子 一条mRNA 两个核糖体识别位点 两个uaa

能具体点吗？这方面不是很懂。第二个核糖体识别位点就不需要ATG了吗
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5楼2014-09-19 09:43:46
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dapaodiao

新虫 (初入文坛)
本来的我酶是包含a和b亚基，在翻译成多肽后自动切去信号肽、a/b间的间隔肽，然后组装成成熟的酶。现在遇到的问题就是发现间隔肽切不开，想在胞内分开表达a和b，这样的话相当于是表达两个独立的多肽，b要翻译的话就需要一个ATG，所以需要人为添加ATG使它翻译。但是b本来的一号位是ser，且是严格保守的，现在就变成1号位是met。有什么办法使得表达时候直接是ser。不想要纯化酶切这种方法。
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2楼2014-09-17 21:35:37
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御猫九首

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dapaodiao: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-19 09:59:31
做一个多顺反子 一条mRNA 两个核糖体识别位点 两个uaa
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好好睡觉，认真学习
3楼2014-09-17 21:47:44
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御猫九首

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-14 13:18:16
gyesang: 回帖置顶 2014-10-14 13:18:26
met的问题用信号肽解决
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好好睡觉，认真学习
4楼2014-09-17 21:48:44
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