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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

[求助] 如何提高蛋白质的溶解性? 已有1人参与

如何提高蛋白质的溶解性?
根据文献记载,其使用的是0.7M NaCl,但是破菌之后,在4°放置很容易析出;
30%的硫酸铵就可以使其析出;
溶液成分:20mM Tris(pH 7.5),0.7M NaCl,1mM EDTA,10% glycerol , 1mM PMSF,0.1% TritonX-100
如果使用硫酸铵沉淀之后,复融之后,很快又会析出;考虑是不是高盐浓度,就改成了0.2M NaCl,可是盐析沉淀溶解性还是不好,
想请问还有什么方法对提高蛋白溶解性有帮助呢?
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 赵鑫易 at 2014-09-23 20:10:18
我们从前面的菌体离心后就一直保存在Balance buffer中破碎,蛋白也在4°里面没见沉淀。
你看的文献是什么,放下看看

谢谢了!
万千种蛋白,总有那么几个是让人很抓狂的!
我现在只能放弃后续的盐析处理,直接从破菌中进行纯化处理了!
4楼2014-09-24 14:58:49
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yxncas-2012

木虫 (正式写手)

没有人回答呢?相关经验也可以参考一下啦!或者有这方面的的文献,也可以发一下啦!不甚感激!
2楼2014-09-17 09:46:08
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赵鑫易

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们从前面的菌体离心后就一直保存在Balance buffer中破碎,蛋白也在4°里面没见沉淀。
你看的文献是什么,放下看看
3楼2014-09-23 20:10:18
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