| 查看: 2875 | 回复: 3 | ||
[求助]
关于ELISA试剂盒的线性范围问题 已有3人参与
|
|
最近在做ELISA试剂盒的定量，遇到了一些问题，在这和大家交流一下。望各位同仁不吝赐教！ 做定量要验证试剂盒的线性范围，目前我的盒子线性范围太窄——线性区间的高点与低点的浓度值比值为16。我尝试了改变反应模式，将线性范围略扩宽了一些——线性区间的高点与低点的浓度值比值为32。如果高点往上一个梯度延伸，则R平方就只有0.96（已经是最好的结果了）。总的来说线性范围还是太窄。我参考了其他一些厂家的ELISA定量试剂盒，基本上线性区间的高点与低点的浓度值比值都≥64。我知道,ELISA的信号值范围窄，但我想线性区间的高点与低点的浓度值比值≥64应该还是可以的。我想请教一下各位战友如何才能将试剂盒的线性范围扩宽？我搜索了论坛没有找到相关帖，那么就从这个帖子开始，我们一块讨论一下吧。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
厉娜
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有15人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有14人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有16人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有15人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- Elisa 实验时实验组的OD值范围一般是多少的
已经有3人回复
- ELISA结果分析
已经有13人回复
- 求助，LPS刺激RAW264.7用ELISA试剂盒检测TNF-α和IL-6怎么做
已经有7人回复
- ELISA试剂盒使用
已经有4人回复
- 线性拟合中的问题
已经有9人回复
- 用ELISA试剂盒测炎症因子的问题
已经有6人回复
- 请问ELISA用的96孔板试剂盒的孔径多大？
已经有4人回复
- elisa试剂盒检测免疫因子的相关问题
已经有9人回复
- 美国RB公司的ELISA试剂盒 或者抗体质量怎么样啊
已经有3人回复
- ELISA同一样品，稀释倍数越高，得到结果越大？为嘛？
已经有16人回复
- Elisa实验中，如何简便地验证酶标板的可靠性？
已经有7人回复
- ELISA的结果分析及相关软件
已经有11人回复
- 【求助/交流】ELISA检测试剂盒检测范围对实验结果影响！
已经有3人回复
- 【求助】ELISA 检测试剂盒里酶标准品稀释液是什么成分
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于OD值范围
已经有4人回复
zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4351 (副教授)
- 金币: 9353.8
- 散金: 1
- 红花: 137
- 帖子: 65983
- 在线: 2452.1小时
- 虫号: 2227382
- 注册: 2013-01-07
- 性别: GG
- 专业: 人类营养
2楼2014-09-03 08:16:59
逍潇
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 5442.1
- 散金: 20
- 红花: 6
- 帖子: 1137
- 在线: 385.6小时
- 虫号: 487765
- 注册: 2007-12-28
- 性别: MM
- 专业: 化学环境污染与健康
3楼2014-09-03 08:31:59
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
630529612: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-09-08 22:19:54
感谢参与，应助指数 +1
630529612: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-09-08 22:19:54
|
线性范围的影响有两个因素：1、本身抗体的亲和力，亲和力越高灵敏度越高，高点与低点比值也就越高，若标准曲线的斜率接近于1，抗体亲和力还是可以的。比值没有相关规定说一定要高于64。 2、本身抗原的影响。不同的蛋白ELISA其灵敏度都不相同，线性范围也不同，如果你的项目在某一浓度达到平台值，说明这个蛋白与其抗体结合与解离在此浓度下达到了平衡，改变其他条件也无法增加，除非改用化学发光法。若是同一种蛋白其线性范围没有其他盒子做的高，可尝试改变条件降低其背景值从而降低低浓度来提高比值。 |
4楼2014-09-03 15:34:59
