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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 植物叶绿体DNA提取结果该如何解释？
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

[求助] 植物叶绿体DNA提取结果该如何解释？ 已有3人参与

第一次提取植物叶绿体DNA，按照文献的方法提取出来跑了个电泳，结果不知该如何解释：泳道2和3都是我提取的叶绿体DNA，但是主条带在3k-5k之间，而文献说叶绿体DNA长度大约为150k，是我在提取过程中DNA断裂吗？

植物叶绿体DNA提取结果该如何解释？
捕获.JPG
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1楼 2014-08-28 08:26:19
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johnkm66

新虫 (初入文坛)
★
感谢参与，应助指数 +1
wu_chunhui(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-28 22:01:07
本帖内容被屏蔽
2楼2014-08-28 10:02:04
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by johnkm66 at 2014-08-28 10:02:04
提取的具体方法？如果是手工提取，出现断裂的可能比较大，但不应该只有一个条带；试剂盒显然无法提取150K的片段，最大只能到23K

是用手工提取的，先研磨材料然后对匀浆液差速离心提取完整叶绿体，DNaseⅠ处理叶绿体，然后提DNA~提取出的DNA经PCR扩增，没有核DNA污染，但是叶绿体DNA标记也没扩增出来
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3楼2014-08-28 11:18:00
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小步顶

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-15 10:16:25
目前手工提取叶绿体判断成功与否的标准是主带必须在23k以上，如果小于23k的那就是提取失败了
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4楼2014-09-16 10:28:23
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小步顶 at 2014-09-16 10:28:23
目前手工提取叶绿体判断成功与否的标准是主带必须在23k以上，如果小于23k的那就是提取失败了

还有就是我用这个模版做了一下核基因的PCR和叶绿体基因的PCR，这两者都没有扩增出来，我感到挺纳闷的，那凝胶电泳跑出来的条带难道是线粒体DNA?
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5楼2014-12-14 19:22:27
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luo641779116

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有木有提取叶绿体DNA 的试剂盒
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6楼2015-09-18 09:35:22
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smile雯子

新虫 (初入文坛)
请问你是怎么提出来的呀，我也刚开始提叶绿体 但是我跑胶，条带就在孔里，跑不出来，也不知道是不是没提出来 求分享经验呀

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7楼2017-06-15 19:05:46
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请叫我king

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_chunhui at 2014-08-28 11:18:00
是用手工提取的，先研磨材料然后对匀浆液差速离心提取完整叶绿体，DNaseⅠ处理叶绿体，然后提DNA~提取出的DNA经PCR扩增，没有核DNA污染，但是叶绿体DNA标记也没扩增出来...

您好，您是怎么确定的提取的叶绿体DNA是没有核DNA污染的？谢谢
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8楼2018-02-28 15:43:29
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