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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

[求助] 植物叶绿体DNA提取结果该如何解释? 已有3人参与

第一次提取植物叶绿体DNA,按照文献的方法提取出来跑了个电泳,结果不知该如何解释:泳道2和3都是我提取的叶绿体DNA,但是主条带在3k-5k之间,而文献说叶绿体DNA长度大约为150k,是我在提取过程中DNA断裂吗?

植物叶绿体DNA提取结果该如何解释?
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johnkm66

新虫 (初入文坛)


感谢参与,应助指数 +1
wu_chunhui(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-28 22:01:07
本帖内容被屏蔽

2楼2014-08-28 10:02:04
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by johnkm66 at 2014-08-28 10:02:04
提取的具体方法?如果是手工提取,出现断裂的可能比较大,但不应该只有一个条带;试剂盒显然无法提取150K的片段,最大只能到23K

是用手工提取的,先研磨材料然后对匀浆液差速离心提取完整叶绿体,DNaseⅠ处理叶绿体,然后提DNA~提取出的DNA经PCR扩增,没有核DNA污染,但是叶绿体DNA标记也没扩增出来
3楼2014-08-28 11:18:00
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小步顶

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-15 10:16:25
目前手工提取叶绿体判断成功与否的标准是主带必须在23k以上,如果小于23k的那就是提取失败了
4楼2014-09-16 10:28:23
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小步顶 at 2014-09-16 10:28:23
目前手工提取叶绿体判断成功与否的标准是主带必须在23k以上,如果小于23k的那就是提取失败了

还有就是我用这个模版做了一下核基因的PCR和叶绿体基因的PCR,这两者都没有扩增出来,我感到挺纳闷的,那凝胶电泳跑出来的条带难道是线粒体DNA?
5楼2014-12-14 19:22:27
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luo641779116

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有木有提取叶绿体DNA 的试剂盒
6楼2015-09-18 09:35:22
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smile雯子

新虫 (初入文坛)

请问你是怎么提出来的呀,我也刚开始提叶绿体 但是我跑胶,条带就在孔里,跑不出来,也不知道是不是没提出来 求分享经验呀

发自小木虫Android客户端
7楼2017-06-15 19:05:46
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请叫我king

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_chunhui at 2014-08-28 11:18:00
是用手工提取的,先研磨材料然后对匀浆液差速离心提取完整叶绿体,DNaseⅠ处理叶绿体,然后提DNA~提取出的DNA经PCR扩增,没有核DNA污染,但是叶绿体DNA标记也没扩增出来...

您好,您是怎么确定的提取的叶绿体DNA是没有核DNA污染的?谢谢
8楼2018-02-28 15:43:29
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