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高通量测序,问一个一直以来比较困惑的问题
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bitezhu
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高通量测序,问一个一直以来比较困惑的问题
所谓双端测序,是测合成的双链cDNA的哪一条链呢?还是说同时从双链的两端开始测,得到PE测序数据?
问题有点弱智,还请各位不吝赐教
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2014-08-26 22:18:24
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是从双链中每条链的5’端各测一条read。
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12楼
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catinshen
at 2014-08-27 11:11:56
是从双链中每条链的5’端各测一条read。
可是如果这样的话,比如说我的cDNA片段是300bp的,如果是从单链的5‘端分别测,采取PE100的策略的话,两个reads中间就没有重叠部分,拼接的时候又是怎么根据reads的overlap进行组装的呢?
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2014-08-29 09:22:23
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bitezhu
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可是如果这样的话,比如说我的cDNA片段是300bp的,如果是从单链的5‘端分别测,采取PE100的策略的话,两个reads中间就没有重叠部分,拼接的时候又是怎么根据reads的overlap进行组装的呢?...
组装的时候是根据一些算法将reads断成一定长度的Kmer进行overlap组装的,PE reads在之后可以用来验证组装的准确性,或者装成scaffolds(测序之后PE reads是一一对应的)
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2014-08-29 16:23:42
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cDNA一般是单链的,双端测序是指在read的两端都测一段序列
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2014-12-03 17:30:04
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13楼
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bitezhu
at 2014-08-29 09:22:23
可是如果这样的话,比如说我的cDNA片段是300bp的,如果是从单链的5‘端分别测,采取PE100的策略的话,两个reads中间就没有重叠部分,拼接的时候又是怎么根据reads的overlap进行组装的呢?...
随机引物不会从精确的从两端开始,所以不用担心重合问题
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17楼
2014-12-05 17:21:40
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