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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 营养安全 » 多肽分离纯化的问题
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xiaozhizhu86

新虫 (初入文坛)

[求助] 多肽分离纯化的问题 已有4人参与

本人研三小硕一枚，在做关于多肽的分离纯化，过完DEAE柱子后，浓度很稀，要冻干再做消耗太大收集的量也不够，所以想直接用收集的组分溶液直接做含量测定和跑电泳，但因为测含量和跑电泳的时候最好能把里面的蛋白质去除，问一下大神们我怎么样才能去除里面的蛋白，只让多肽留下来。谢谢！
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1楼 2014-08-25 16:50:41
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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xiaozhizhu86(zybpxy代发): 金币+1, 欢迎继续关注此贴，问题解决后请点右下角通知版主处理，我们将发给悬赏金币，并给与一定鼓励 2014-08-25 22:04:34
如果多肽和蛋白分子量差很多，建议用超滤离心管，按分子量进行分离，多肽就在透过液里
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2楼2014-08-25 19:37:54
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芯微蓝

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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跑一个液相，收集所要多肽处的峰可以吗？我也是新手，仅供参考哈
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3楼2014-08-25 20:14:44
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xiaozhizhu86

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-25 19:37:54
如果多肽和蛋白分子量差很多，建议用超滤离心管，按分子量进行分离，多肽就在透过液里

但是如果不清楚分子量呢，是不是要跑电泳先看一下分子量啊，还有超滤用多少的离心管合适呢
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4楼2014-08-25 20:36:20
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煜，莫烦恼

木虫 (著名写手)

虫蛹

【答案】应助回帖

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超滤过膜，分析+制备液相

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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努力努力，奋斗奋斗！
5楼2014-08-26 00:36:17
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fm707755

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xiaozhizhu86(zybpxy代发): 金币+3, 鼓励应助，问题解决后麻烦点一下右下角通知斑竹处理哈 2014-08-26 23:17:46
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaozhizhu86 at 2014-08-25 20:36:20
但是如果不清楚分子量呢，是不是要跑电泳先看一下分子量啊，还有超滤用多少的离心管合适呢...

如果不清楚分子量，最好跑一下电泳看看。超滤是根据分子量来定的，不确定分子量，这个也没法定
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6楼2014-08-26 18:10:32
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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xiaozhizhu86(zybpxy代发): 金币+1, 欢迎继续关注此贴，问题解决后请点右下角通知版主处理，我们将发给悬赏金币，并给与一定鼓励 2014-08-26 23:17:55
凝胶过滤层析，根据分子量大小将小分子的多肽和大分子的蛋白分开。
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7楼2014-08-26 19:41:26
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zhenyuhao

金虫 (小有名气)
你好，你蛋白是用什么沉淀的？谢谢
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8楼2014-12-29 14:44:52
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你们那么

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-25 19:37:54
如果多肽和蛋白分子量差很多，建议用超滤离心管，按分子量进行分离，多肽就在透过液里

我也用过超滤离心管，但是分离效果不佳，比如用100KD的分离牛奶后，用截留液做电泳，发现20-100KD还有条带，且条带颜色很深，你遇到过这种情况吗？是不是我的样品蛋白比较复杂，各种分子量的都有，还是什么原图？
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9楼2016-05-03 15:34:04
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爱而成交

金虫 (正式写手)
等电点沉淀蛋白！

发自小木虫Android客户端
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任凭周糟如何，学习与拼博的初心不变。
10楼2016-05-03 22:18:08
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