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xiaozhizhu86

新虫 (初入文坛)

[求助] 多肽分离纯化的问题 已有4人参与

本人研三小硕一枚,在做关于多肽的分离纯化,过完DEAE柱子后,浓度很稀,要冻干再做消耗太大收集的量也不够,所以想直接用收集的组分溶液直接做含量测定和跑电泳,但因为测含量和跑电泳的时候最好能把里面的蛋白质去除,问一下大神们我怎么样才能去除里面的蛋白,只让多肽留下来。谢谢!
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fm707755

金虫 (小有名气)

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如果多肽和蛋白分子量差很多,建议用超滤离心管,按分子量进行分离,多肽就在透过液里
2楼2014-08-25 19:37:54
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芯微蓝

金虫 (初入文坛)

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跑一个液相,收集所要多肽处的峰可以吗?我也是新手,仅供参考哈
3楼2014-08-25 20:14:44
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xiaozhizhu86

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-25 19:37:54
如果多肽和蛋白分子量差很多,建议用超滤离心管,按分子量进行分离,多肽就在透过液里

但是如果不清楚分子量呢,是不是要跑电泳先看一下分子量啊,还有超滤用多少的离心管合适呢
4楼2014-08-25 20:36:20
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煜,莫烦恼

木虫 (著名写手)

虫蛹

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超滤过膜,分析+制备液相

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
努力努力,奋斗奋斗!
5楼2014-08-26 00:36:17
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fm707755

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★
xiaozhizhu86(zybpxy代发): 金币+3, 鼓励应助,问题解决后麻烦点一下右下角通知斑竹处理哈 2014-08-26 23:17:46
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaozhizhu86 at 2014-08-25 20:36:20
但是如果不清楚分子量呢,是不是要跑电泳先看一下分子量啊,还有超滤用多少的离心管合适呢...

如果不清楚分子量,最好跑一下电泳看看。超滤是根据分子量来定的,不确定分子量,这个也没法定
6楼2014-08-26 18:10:32
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

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凝胶过滤层析,根据分子量大小将小分子的多肽和大分子的蛋白分开。
7楼2014-08-26 19:41:26
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zhenyuhao

金虫 (小有名气)

你好,你蛋白是用什么沉淀的?谢谢
8楼2014-12-29 14:44:52
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你们那么

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fm707755 at 2014-08-25 19:37:54
如果多肽和蛋白分子量差很多,建议用超滤离心管,按分子量进行分离,多肽就在透过液里

我也用过超滤离心管,但是分离效果不佳,比如用100KD的分离牛奶后,用截留液做电泳,发现20-100KD还有条带,且条带颜色很深,你遇到过这种情况吗?是不是我的样品蛋白比较复杂,各种分子量的都有,还是什么原图?
9楼2016-05-03 15:34:04
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爱而成交

金虫 (正式写手)

任凭周糟如何,学习与拼博的初心不变。
10楼2016-05-03 22:18:08
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