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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 请问多肽纯化要用什么方法
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tdairy09

金虫 (正式写手)

[求助] 请问多肽纯化要用什么方法

我想从酸奶里面分离纯化5K D一下的疏水性肽，请问应该用什么方法？
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在坚持中创新
1楼 2014-04-15 18:50:00
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tdairy09: 金币+10, ★★★很有帮助, 多谢了！ 2014-04-19 08:29:15
先还是想办法把杂蛋白给去掉，最好是做一下杂蛋白沉淀，然后再上凝胶色谱柱。或者是反相色谱柱，
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2楼2014-04-15 22:50:33
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wangbingcool

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tdairy09: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2014-04-19 08:29:36
先跑胶吧，然后把5KD以下的切出来重溶下。然后根据疏水性差异跑柱吧，或者层析。。

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3楼2014-04-16 09:48:38
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分离高手

新虫 (小有名气)
首先超滤  去除大分子蛋白  然后层析  收集所要蛋白
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4楼2014-04-20 06:17:49
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tdairy09

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 分离高手 at 2014-04-20 06:17:49
首先超滤  去除大分子蛋白  然后层析  收集所要蛋白

请问超滤应该如何操作呢？用滤纸还是什么措施呢？
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在坚持中创新
5楼2014-04-20 08:55:33
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分离高手

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by tdairy09 at 2014-04-20 08:55:33
请问超滤应该如何操作呢？用滤纸还是什么措施呢？...

先用截留分量比较大的2万左右的超滤膜把酸奶里的大分子蛋白除掉，透过你的5K的多肽，收集这部分多肽，这里面基本上都是这一分子量段的多肽，再用反向层析树脂或者硅胶进行层析，得到单个的你所需要的多肽就行了。
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tdairy09
6楼2014-04-21 19:05:12
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tdairy09

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 分离高手 at 2014-04-21 19:05:12
先用截留分量比较大的2万左右的超滤膜把酸奶里的大分子蛋白除掉，透过你的5K的多肽，收集这部分多肽，这里面基本上都是这一分子量段的多肽，再用反向层析树脂或者硅胶进行层析，得到单个的你所需要的多肽就行了。...

真心感谢您的解答，谢谢！
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在坚持中创新
7楼2014-04-22 08:07:19
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tdairy09

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 分离高手 at 2014-04-21 19:05:12
先用截留分量比较大的2万左右的超滤膜把酸奶里的大分子蛋白除掉，透过你的5K的多肽，收集这部分多肽，这里面基本上都是这一分子量段的多肽，再用反向层析树脂或者硅胶进行层析，得到单个的你所需要的多肽就行了。...

祝生活愉快，身体健康！送红花一朵！
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在坚持中创新
8楼2014-04-22 08:09:14
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