应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 固相合成没有酪氨酸 苯丙氨酸的多肽纯化问题
71/1返回列表
查看: 1184  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

两世为人

铁虫 (小有名气)

[求助] 固相合成没有酪氨酸 苯丙氨酸的多肽纯化问题

合成的小肽 在280nm没有吸收，在214nm有吸收。但是这个波长 我做离子交换层析用的盐（醋酸铵）也有吸收。离子交换洗脱液在分析液相上看不出来那个是盐那个是我的目标肽（等度洗脱）。怎么办？是换没有吸收的盐  还是可以通过梯度洗脱把盐和目标肽在液相上分开？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

多肽合成

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
向日葵
1楼 2013-11-21 23:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
两世为人: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-12-02 10:08:14
1.最方便是液质联用，直接就知道了。2.反相柱极性大的先出，盐应该是在柱子上没保留的。3.为啥要用离子交换呀，直接反相制备液相不是更好，毕竟杂质都是缺失肽，带电情况不一定相差很大。
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-22 09:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

两世为人

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-11-22 09:01:55
1.最方便是液质联用，直接就知道了。2.反相柱极性大的先出，盐应该是在柱子上没保留的。3.为啥要用离子交换呀，直接反相制备液相不是更好，毕竟杂质都是缺失肽，带电情况不一定相差很大。

做了一个三肽 液相纯水走的 5min出峰还比较杂，怎么让他晚一些出峰，还能分开些
赞一下 回复此楼
向日葵
3楼2013-12-02 10:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 两世为人 at 2013-12-02 10:08:01
做了一个三肽 液相纯水走的 5min出峰还比较杂，怎么让他晚一些出峰，还能分开些...

LZ的肽极性有点太大了吧，反相保留过短，要是酸性的可以加少量三氟乙酸0.1%或0.05%，抑制一下羧基的电离，能在柱子上保留长些。再不行就用缓冲盐试一下，但每次用完一定要用水把盐冲干净。碱性的就没啥好办法了，只能试试特殊的填料的反相柱，实在不行就上氰基柱走正向体系试试。三肽一般纯度很高的，非缓冲的条件下会不会多肽本身的电离状态不止一个，有时可能会出现多个峰。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-02 10:30:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

两世为人

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-12-02 10:30:28
LZ的肽极性有点太大了吧，反相保留过短，要是酸性的可以加少量三氟乙酸0.1%或0.05%，抑制一下羧基的电离，能在柱子上保留长些。再不行就用缓冲盐试一下，但每次用完一定要用水把盐冲干净。碱性的就没啥好办法了，只 ...

谢谢啊。我的肽其实是四肽，羧基到氨基应该是赖氨酸，精氨酸和一个人工合成的二肽。应该是碱性的吧。可不可以反过来想：加三氟乙酸让氨基全部电离，这样是不是也应该是一个峰？
赞一下 回复此楼
向日葵
5楼2013-12-03 17:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 两世为人 at 2013-12-03 17:18:07
谢谢啊。我的肽其实是四肽，羧基到氨基应该是赖氨酸，精氨酸和一个人工合成的二肽。应该是碱性的吧。可不可以反过来想：加三氟乙酸让氨基全部电离，这样是不是也应该是一个峰？...

理论上是的，但全电离保留时间短，主峰靠前，就怕在柱上保留时间过短，和杂质分不开或和溶剂峰接近。用梯度洗脱，A，水-三氟乙酸 ，B乙腈-三氟乙酸，B从0到20%，30min试试，看能不能分开，算一下出峰时的乙腈浓度，细调梯度变化率
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

两世为人
6楼2013-12-03 19:40:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

两世为人

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-12-03 19:40:57
理论上是的，但全电离保留时间短，主峰靠前，就怕在柱上保留时间过短，和杂质分不开或和溶剂峰接近。用梯度洗脱，A，水-三氟乙酸 ，B乙腈-三氟乙酸，B从0到20%，30min试试，看能不能分开，算一下出峰时的乙腈浓度， ...

先谢谢啊 ，我晚上去试试。0.05的TFA足够了吧。
赞一下 回复此楼
向日葵
7楼2013-12-03 20:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 两世为人 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭