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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 胞外蛋白组提取方法 已有2人参与

请教一下做双向的大神们,胞外蛋白组都是用什么方法提取的?
目前考虑到的几种方法都有一个很大的问题就是试剂用量太大,文献里有提到的是将上清直接冷冻干燥,可是我们这边冷冻干燥都要求先浓缩一下的,又不能把上清加热,不知道该怎么浓缩啊,愁死了。或者有没有大神有什么比较好的方法提取胞外蛋白的,跪求
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

这是第三贴?我记下来了。我也可以用三句话打发你这个问题,不过我想还是仔细回答你比较好。所以今天暂时不回答你。
2楼2014-08-23 22:44:54
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七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-23 22:44:54
这是第三贴?我记下来了。我也可以用三句话打发你这个问题,不过我想还是仔细回答你比较好。所以今天暂时不回答你。

求早日回复
3楼2014-08-24 10:13:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
通常都是要浓缩的,可以用丙酮沉淀,样品:丙酮=1:4,-20℃放置1 h以上,超速离心。除尽丙酮。
4楼2014-08-24 10:29:32
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七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-08-24 10:29:32
通常都是要浓缩的,可以用丙酮沉淀,样品:丙酮=1:4,-20℃放置1 h以上,超速离心。除尽丙酮。

可是这样要用大量的丙酮,没有浓缩直接沉淀的话都不一定沉得出蛋白来
5楼2014-08-24 11:09:37
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279696866

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有试剂盒的。。。你可以搜索一下
6楼2014-08-25 14:38:42
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七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 279696866 at 2014-08-25 14:38:42
有试剂盒的。。。你可以搜索一下

你说的试剂盒提取蛋白是不是也要先对发酵液进行浓缩的?因为发酵液中的蛋白浓度低
7楼2014-08-31 22:01:19
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279696866

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 七小艾 at 2014-08-31 22:01:19
你说的试剂盒提取蛋白是不是也要先对发酵液进行浓缩的?因为发酵液中的蛋白浓度低...

浓缩是肯定的。。。。。。。。。
8楼2014-09-01 08:36:56
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七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 279696866 at 2014-09-01 08:36:56
浓缩是肯定的。。。。。。。。。...

我问的就是浓缩的方法
9楼2014-09-01 11:41:20
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279696866

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 七小艾 at 2014-09-01 11:41:20
我问的就是浓缩的方法...

切向流浓缩是一种
10楼2014-09-02 08:32:59
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