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[交流]
生物SEM样品交流 已有2人参与
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细胞，细菌的电镜样品越来越多的人涉及，不知道有没有同行可以交流一下。特别是样品冷冻干燥的一些技巧。 wenzi_m001.jpg  wenzi_m002.jpg  wenzi_m005.jpg  wenzi_m008.jpg  wenzi_m016.jpg |
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snoopytbw
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我做过细菌的SEM 首先，前期处理非常关键。一般情况下，细菌要做SEM，都是观察其在某表面的分布形态以及结构变化等，那么前期固定过程非常关键。 传统的固定方法是使用0.25%的戊二醛预固定30分钟，再通过2.5%戊二醛固定3-6小时，利用梯度浓度的酒精进行脱水，再进行二氧化碳临界点干燥或非真空冷干后上样。一般需要进行喷金或喷碳处理后才能进行SEM分析。 但是有些样品中戊二醛会与表界面物质发生反应，不适合该方法进行预处理，如果戊二醛固定后脱水，会导致电镜下白色絮状物沉淀过多。那么这样的样品做SEM则需要改用乙酸乙酯进行固定，且酒精脱水应尽可能的减少，否则容易导致样品丢失。如果样品在真空中易变性的话，需要进行环境SEM分析，也就是低真空环境的SEM。（有环扫仪器的话才能做） |
2楼2014-08-12 12:17:28
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snoopytbw
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