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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于冷冻干燥样品的预处理
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jieric27

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于冷冻干燥样品的预处理

有一个样品需要冷冻干燥后做SEM，水作溶剂，请问样品需要怎样预处理
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1楼 2011-03-15 16:37:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

永恒的阳光

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2011-03-15 16:54:25:
-80℃至少冻12 h，再上冻干机。

所有要冷干的样品都要预冻吗？？？直接冷冻干燥不可以吗？会有什么影响呢？
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4楼2011-04-25 18:41:52
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
love_in_em(金币+1): 鼓励交流。 2011-04-26 07:51:03
引用回帖:
Originally posted by 永恒的阳光 at 2011-04-25 18:41:52:
所有要冷干的样品都要预冻吗？？？直接冷冻干燥不可以吗？会有什么影响呢？

冻干是冰直接升华，液态水会沸腾，还可能造成干燥不完全（成粘稠状）。
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5楼2011-04-25 21:46:31
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wt3532

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
scelab(金币+4): 谢谢交流 2011-04-27 08:34:22
引用回帖:
Originally posted by 永恒的阳光 at 2011-04-25 18:41:52:
所有要冷干的样品都要预冻吗？？？直接冷冻干燥不可以吗？会有什么影响呢？

样品肯定要预冻的，如果是液体状态下或者预冻温度不够，抽真空的时候样品就会起泡（样品冻干失败）或者直接沸腾（和气压低，水沸腾一个道理），前面还好，后面的如果不管的话，你的冻干机就悲剧了，如果液体进入真空泵的泵油里，然后那个油高速旋转，乳化，你的油也废掉了。
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7楼2011-04-26 16:40:10
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wuhailei88

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-04-27 19:45:41
我平时就-20冷冻 ，再就直接冷冻干燥了
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12楼2011-04-27 16:30:31
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-15 19:29:19
-80℃至少冻12 h，再上冻干机。
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2楼2011-03-15 16:54:25
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802311820

金虫 (小有名气)
★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~~ 2011-03-22 19:40:51
jieric27(金币+1): 2011-03-23 13:05:23
先请教个问题，这个SEM是什么？（baidu里搜到的不知道是否正确）
如果是微生物菌体做冷冻干燥，一般现在-20℃预冻30min，再在-80℃冷冻30min（时间要根据样品量考虑，该30min仅限于少量样品），然后上真空机抽干，也就是让冰粒快速升华，是样品干燥，最后熔封。
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3楼2011-03-22 09:38:03
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love_in_em

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 802311820 at 2011-03-22 09:38:03:
先请教个问题，这个SEM是什么？（baidu里搜到的不知道是否正确）
如果是微生物菌体做冷冻干燥，一般现在-20℃预冻30min，再在-80℃冷冻30min（时间要根据样品量考虑，该30min仅限于少量样品），然后上真空机抽干 ...

SEM：扫描电镜吧
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6楼2011-04-26 06:20:15
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wt3532

木虫 (著名写手)
★ ★
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rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-04-27 19:45:15
这个-80度恐怖了吧，-40冷冻4h足够了，但是样品要薄，我通常是-70预冻4h，然后抽真空。
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8楼2011-04-26 16:42:19
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永恒的阳光

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by wt3532 at 2011-04-26 16:40:10:
样品肯定要预冻的，如果是液体状态下或者预冻温度不够，抽真空的时候样品就会起泡（样品冻干失败）或者直接沸腾（和气压低，水沸腾一个道理），前面还好，后面的如果不管的话，你的冻干机就悲剧了，如果液体进 ...

是要预冻，可以在冻干机里进行呀！为什么看好多人把样品放进冻干机之前要在低温冰箱里先预冻，这样的话在冻干机里的预冻起什么作用呢？
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9楼2011-04-26 16:55:48
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wt3532

木虫 (著名写手)
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scelab(金币+5, EPI+1): 鼓励热心交流 2011-04-27 08:34:53
引用回帖:
Originally posted by 永恒的阳光 at 2011-04-26 16:55:48:
是要预冻，可以在冻干机里进行呀！为什么看好多人把样品放进冻干机之前要在低温冰箱里先预冻，这样的话在冻干机里的预冻起什么作用呢？

这个我没说清楚，如果有-40冰箱或者-70冰箱的话，直接在冰箱里预冻，这样比较省能源。
如果没有低温冰箱，建议先放到-20冰箱（这个大家都有的吧），然后放冻干机冷阱中冻，这样可以加快预冻的速度，有的冻干机冷阱带预冻功能，但是有的冻干机冷阱不能打开的，或者有的冻干机得冻干室有预冻功能（但是那个制冷能力太弱了），这个是我自己结合自己的经验说的，不同的机器不一样，但是原理都是一样的。
还有就是预冻完了后，从冷阱或者低温冰箱拿出来的时候，样品表层会有部分融化，这时建议隔板不开加热，直接开真空泵，使样品升华，温度降下来，当然，如果你速度够快，这一步也可以不要。（最好还是结合你的机器问一下生产厂家，他们会给你答复的）。
最后，祝实验顺利。
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10楼2011-04-26 22:15:33
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永恒的阳光

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by wt3532 at 2011-04-26 22:15:33:
这个我没说清楚，如果有-40冰箱或者-70冰箱的话，直接在冰箱里预冻，这样比较省能源。
如果没有低温冰箱，建议先放到-20冰箱（这个大家都有的吧），然后放冻干机冷阱中冻，这样可以加快预冻的速度，有的冻干机 ...

谢谢你！！实验室有-80和-20度冰箱，在冷肼中预冻是挺慢的！我还想请教一些问题，第一：我设置了预冻温度，但是如果设置的时间短就达不到预冻温度，设置的时间长温度会继续降低，感觉设置的温度不起作用，您知道是怎么回事吗？第二：鉴于第一点，我害怕在-20度冰箱里预冻过的放进冷肼温度会持续降低……第三：如果在低温冰箱里预冻，至少得过夜，这样还不如在冷肼里预冻两三个小时就可以了，是吗？
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11楼2011-04-27 08:20:04
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wt3532

木虫 (著名写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 永恒的阳光 at 2011-04-27 08:20:04:
谢谢你！！实验室有-80和-20度冰箱，在冷肼中预冻是挺慢的！我还想请教一些问题，第一：我设置了预冻温度，但是如果设置的时间短就达不到预冻温度，设置的时间长温度会继续降低，感觉设置的温度不起作用，您知 ...

我们当时的冷肼温度差不多是-43度，把样品直接丢进去就好了，没有设置预冻温度，你的温度持续下降这个问题我没遇到过。这个样品的温度低于共熔点就好了（查文献一般为-26度左右吧，可能不同样品不一样，预冻是把整个样品的温度都均一的达到共熔点以下）第二点，下午提早一点放-80度冰箱不就可以了吗，直接放冷肼中预冻你还是需要把样品拿出来放到隔板上的，不能在冷肼中冻干吧，这个在哪预冻看个人习惯了，不过在冷
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13楼2011-04-27 22:34:40
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wt3532

木虫 (著名写手)
（按错键了）肼中预冻要开真空泵，那个噪音，那个温度，我是受不了，放-80多省事啊。
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14楼2011-04-27 22:35:54
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高山流水6568

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼上的你们好！我现在做从菠萝中提取菠萝蛋白酶，是经过盐析然后冷冻离心使酶和溶液分离，最后也要也要真空冷冻干燥得到粉末状的产品，我的问题是：是要把离心之后的酶配成溶液然后再预冻吗？麻烦各位大侠们了。
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15楼2013-11-14 13:10:41
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jhwen101

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
样品少-20度2小时就可以了，多了就得分两步预冻

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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16楼2013-11-15 09:21:04
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泉微小新

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by wt3532 at 2011-04-26 16:40:10
样品肯定要预冻的，如果是液体状态下或者预冻温度不够，抽真空的时候样品就会起泡（样品冻干失败）或者直接沸腾（和气压低，水沸腾一个道理），前面还好，后面的如果不管的话，你的冻干机就悲剧了，如果液体进入真 ...

我的样品是直接开冷冻和抽真空，第二天早上托盘上的液体样品起泡了，且呈粘稠状！！！
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17楼2014-10-17 11:24:21
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