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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 关于免疫荧光和免疫组化抗体稀释的问题
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沐尘飞飞是

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于免疫荧光和免疫组化抗体稀释的问题 已有2人参与

本人刚接触免疫实验，有些小白问题向众位重友请教。
一，摸抗体浓度的时候一般是按什么倍数稀释，设置几个浓度梯度？
二，说明书上的用5μg/ml 怎么做到的，怎么知道抗体的重量啊？
三，是不是沉糖的组织不能用来做石蜡包埋切片？
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1楼 2014-08-09 15:32:36
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hongqifei

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沐尘飞飞是 at 2014-08-10 21:57:34
就是30%蔗糖脱水的组织
...

30%蔗糖脱水的组织是不能直接用石蜡包埋的，用酒精、二甲苯之类泡一泡应该就可以了吧，主要是要把水完全去掉同时又能溶解石蜡。
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
4楼2014-08-13 12:46:58
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hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
沐尘飞飞是: 金币+5, ★有帮助 2014-08-10 21:58:00
一抗的稀释比例要参照抗体的说明书来定。一般在1:50~1:1000之间。
抗体说明书上一般会注明抗体的浓度，一般在0.1~1mg/mL之间吧。
“沉糖的组织”不是很明白。
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
2楼2014-08-10 10:47:38
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沐尘飞飞是

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hongqifei at 2014-08-10 10:47:38
一抗的稀释比例要参照抗体的说明书来定。一般在1:50~1:1000之间。
抗体说明书上一般会注明抗体的浓度，一般在0.1~1mg/mL之间吧。
“沉糖的组织”不是很明白。

就是30%蔗糖脱水的组织

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-08-10 21:57:34
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星际舟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1、I抗的浓度可以根据抗体的说明书或者之前发表文献所用的浓度开始进行摸，具体设置几个梯度，可以根据抗体的效价，稍微拉大些，摸到后再在小范围内寻找最适浓度。
2、抗体的总体积知道，又有浓度，重量不就知道了吗？
3、第三个我也不太清楚，不好意思。
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互相交流，共同进步
5楼2014-08-15 16:16:28
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