24小时热门版块排行榜    

查看: 2953  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

whb21

木虫 (著名写手)

[求助] 重组蛋白免疫动物制备单抗 已有6人参与

如题,最近在做重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,有一些重组蛋白是包涵体形式表达的,请问各位大神,这样的蛋白做免疫的话效果如何?尝试过包涵体变性复性,结果免疫失败,请各位大神给点建议,多谢多谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-05 02:18:49
另外,包涵体的变性复性有一系列的实验流程,不是随便一做就行的。我提供给你一个包涵体提纯、变性和复性的实验流程,请自行参考。具体问题可以再讨论。

多谢多谢,我首先拿到包涵体,用6M盐酸胍将其溶解,采用透析复性方法拿到可溶性蛋白,SDS-PAGE能够检测到目的蛋白,且纯度>90%,复性液中含有0.5M盐酸胍,接着用PBS稀释复性蛋白进行小鼠免疫,3周后取血检测血清,结构无抗体产生......麻烦专家给分析分析,十分感谢
6楼2014-08-07 19:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

gu666hong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whb21(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:46:38
你变性复性怎么做的,刚歹说下啊,为什么会失败?做western blot了?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-04 22:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whb21(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:46:53
你不会是在说直接用包涵体粉碎后去免疫动物吧?粉碎后的包涵体的抗原免疫簇(如果真的存在的 话)那可也是与天然状态的蛋白质的抗原免疫簇完全不同的。
3楼2014-08-05 02:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:47:01
whb21: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-08-07 19:45:56
另外,包涵体的变性复性有一系列的实验流程,不是随便一做就行的。我提供给你一个包涵体提纯、变性和复性的实验流程,请自行参考。具体问题可以再讨论。

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Purificationofinclusionbodiesandrefoldingofproteins.pdf
  • 2014-08-05 02:25:03, 93.73 K
4楼2014-08-05 02:18:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见