24小时热门版块排行榜    

查看: 2625  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

whb21

木虫 (著名写手)

[求助] 重组蛋白免疫动物制备单抗 已有6人参与

如题,最近在做重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,有一些重组蛋白是包涵体形式表达的,请问各位大神,这样的蛋白做免疫的话效果如何?尝试过包涵体变性复性,结果免疫失败,请各位大神给点建议,多谢多谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whb21

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-05 02:18:49
另外,包涵体的变性复性有一系列的实验流程,不是随便一做就行的。我提供给你一个包涵体提纯、变性和复性的实验流程,请自行参考。具体问题可以再讨论。

多谢多谢,我首先拿到包涵体,用6M盐酸胍将其溶解,采用透析复性方法拿到可溶性蛋白,SDS-PAGE能够检测到目的蛋白,且纯度>90%,复性液中含有0.5M盐酸胍,接着用PBS稀释复性蛋白进行小鼠免疫,3周后取血检测血清,结构无抗体产生......麻烦专家给分析分析,十分感谢
6楼2014-08-07 19:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

gu666hong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whb21(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:46:38
你变性复性怎么做的,刚歹说下啊,为什么会失败?做western blot了?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-04 22:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
whb21(youlinglyw代发): 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:46:53
你不会是在说直接用包涵体粉碎后去免疫动物吧?粉碎后的包涵体的抗原免疫簇(如果真的存在的 话)那可也是与天然状态的蛋白质的抗原免疫簇完全不同的。
3楼2014-08-05 02:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-08-05 09:47:01
whb21: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-08-07 19:45:56
另外,包涵体的变性复性有一系列的实验流程,不是随便一做就行的。我提供给你一个包涵体提纯、变性和复性的实验流程,请自行参考。具体问题可以再讨论。

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Purificationofinclusionbodiesandrefoldingofproteins.pdf
  • 2014-08-05 02:25:03, 93.73 K
4楼2014-08-05 02:18:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
请填处理意见