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linzshit

银虫 (小有名气)

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[求助] 如何鉴定一种DNA样本中的不同样本类型所占百分比已有3人参与

现在遇到一个技术难点，举个例子就是我混合两种不同的质粒A和B，质粒之间只存在一个点的差别，我用定量的方式确定两种质粒的浓度，然后进行混合，混合方式为A/(A+B)=5%，这里的百分比是浓度比。现在问题来了，对于混合后的样本，我想鉴定它到底是不是按我预想的混合成5%了，有什么方法吗？希望大神能够解答，谢谢

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1楼 2014-07-28 14:25:08

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柠萌粉

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引用回帖:

5楼: Originally posted by linzshit at 2014-07-29 09:27:13
我的模板是已经混合好的，想通过一种方式直接将混合物中两种组分都精确定量。你说的A引物检测B,B引物检测A我不太能理解，从结合效率上，这样两种引物对于单碱基突变模板的Ct变化最大在3左右，当然这是我自己做的不 ...

以下都是乱想的：
1.酶切试试呢，在突变点上找个酶切位点，别的地方再找一个，做双酶切，无突变的就成线性一条带，有突变的变成两条，再用quality one 算下浓度（双酶切是因为都变成线性化的状态比较好吧）