24小时热门版块排行榜    

查看: 2048  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linzshit

银虫 (小有名气)

[求助] 如何鉴定一种DNA样本中的不同样本类型所占百分比 已有3人参与

现在遇到一个技术难点,举个例子就是我混合两种不同的质粒A和B,质粒之间只存在一个点的差别,我用定量的方式确定两种质粒的浓度,然后进行混合,混合方式为A/(A+B)=5%,这里的百分比是浓度比。现在问题来了,对于混合后的样本,我想鉴定它到底是不是按我预想的混合成5%了,有什么方法吗?希望大神能够解答,谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

高通量测序

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠萌粉

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
linzshit(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-29 11:53:18
southern探针都比较长,单个碱基突变似乎不好做
可以试试看QPCR的方法,把突变点设置为3'最后一个碱基
A引物扩增B的 B引物扩增A的 看看能否达到区分效果(看ct值差别大不大。。)
如果质粒量比较足的话,还可以试试酶切。。
不是大神的路过
3楼2014-07-28 18:34:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
linzshit(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-29 11:53:10
大神的不是 可以做soutern blot
2楼2014-07-28 14:33:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linzshit

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-28 14:33:14
大神的不是 可以做soutern blot

southern的话是如何做到定量的啊,我需要精确定量到5%,这个能实现吗?
4楼2014-07-29 09:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linzshit

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 柠萌粉 at 2014-07-28 18:34:46
southern探针都比较长,单个碱基突变似乎不好做
可以试试看QPCR的方法,把突变点设置为3'最后一个碱基
A引物扩增B的 B引物扩增A的 看看能否达到区分效果(看ct值差别大不大。。)
如果质粒量比较足的话,还可以试 ...

我的模板是已经混合好的,想通过一种方式直接将混合物中两种组分都精确定量。你说的A引物检测B,B引物检测A我不太能理解,从结合效率上,这样两种引物对于单碱基突变模板的Ct变化最大在3左右,当然这是我自己做的不算定义,然后只有引物不同的话也无法收到两条扩增曲线啊,望深度指导。
5楼2014-07-29 09:27:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗? 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by 我的船我的海
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 304求调剂 +6 小熊joy 2026-03-14 6/300 2026-03-16 12:59 by Iveryant
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
信息提示
请填处理意见