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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » BL21转化后菌株，总是要20+小时才能摇到OD0.5以上
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drizzle张张

新虫 (初入文坛)

[求助] BL21转化后菌株，总是要20+小时才能摇到OD0.5以上 已有2人参与

如题，小女初入生物实验，多有不懂。最近转化了质粒进入BL21，kana抗性，先在10ml的离心管里加入5ml的LB培养基小摇10+小时，然后向1L的LB中加入500ml的LB大摇20+小时。这样正常吗？怎么能提高速度？
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1楼 2014-07-27 20:24:38
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
降低kana至30ug/ml,离心管用3ml就够了，扩大培养时多取点。就酱紫
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2楼2014-07-27 21:06:43
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1L摇瓶中加入100-200 ml LB培养基吧。一般3h左右OD600到0.5了
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做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2014-07-28 08:45:56
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drizzle张张

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-07-27 21:06:43
降低kana至30ug/ml,离心管用3ml就够了，扩大培养时多取点。就酱紫

但文献上用的浓度比我的还大，所以一直不敢降低浓度啊……
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4楼2014-08-04 17:40:29
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drizzle张张

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-07-28 08:45:56
1L摇瓶中加入100-200 ml LB培养基吧。一般3h左右OD600到0.5了

我们也有摇的那么快的质粒，但这个不知道怎么了，很郁闷啊
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5楼2014-08-04 17:41:55
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by drizzle张张 at 2014-08-04 17:41:55
我们也有摇的那么快的质粒，但这个不知道怎么了，很郁闷啊...

难道质粒会表达毒性蛋白？？

如果是的话，长起来的菌体估计大部分不含质粒了
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做一个阳光、开朗的小和尚
6楼2014-08-04 18:08:26
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