| 查看: 3746 | 回复: 12 | ||||
[交流]
巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题，已用离心和加Nacl方法测试 已有9人参与
|
||||
|
大家好，我最近一直在尝试把巯基修饰的ssDNA链接到13nm的纳米金颗粒上。我先用Ka2CO3将柠三钠还原法制备的13nm纳米金溶液PH值调到9.5左右，加入微量PB稀释的抗体形成不饱和的AU－抗体复合物，静置2小时后直接加入巯基修饰的ssDNA，终浓度约为0.2uM，上摇床4度下12小时后取出。此时如果用1ml枪头反复缓慢吸打，大约几十次后会在枪头处形成如照片中的深黯红色痕迹。 为了检查ssDNA是否的确牢固地与Au连接形成Au-S共价结合，我取样后分成两组进行测试，且保留了一份未加DNA的纳米金(同样加了微量抗体)作为参照，并分别做了离心和加Nacl的对比。 当第一组上离心机10000rpm下10'后，发现无论是否加入DNA，所有的组别的底部都出现黑色聚集无法重悬，同时溶液中也存在有部分呈红色的完好纳米金。这应该表明ssDNA没有成功连接到Au上。 但是我在第二组中快速加入Nacl使终浓度达到0.3M时，发现未加DNA的那一份Au在1分钟内迅速变蓝，1小时左右完全变透明，溶液内有黑色聚集物，管壁上略有黑色吸附(照片中中间的EP管)。毫无疑问这就是Au聚集了的表现。 然而加了DNA的那一份Au溶液一开始没有变化，直到2小时左右，管壁上才开始逐渐出现红色吸附物，8小时后溶液变清，管壁上有大量的红色吸附物，且无法重悬。(照片中最左边的EP管)。所有的EP管都是进口的没有专门做硅化，但是加了DNA与未加DNA的表现有很大差异，这样的话，请教大家究竟ssDNA是成功连接上了Au呢？还是没有成功？有什么更好办法来确保连接成功呢？ 谢谢大家了。  照片 (2).JPG  照片 (1).JPG  照片.JPG |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 观-精-记 |
» 猜你喜欢
分享一款实验室长期在用的 TEV 蛋白酶，蛋白纯化党可以参考下
已经有1人回复
-
这些Scopus收录的英文国际期刊正在征稿（快速审稿）2026年底前免APC！
已经有12人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有207人回复
-
做mRNA体外加帽，Cap0转Cap1效率不稳？分享一款2´-O甲基转移酶实测感受
已经有0人回复
-
美国南加大(USC)药学院Prof. Yong (Tiger) Zhang课题组诚聘博士后
已经有4人回复
-
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
lucias
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2593.4
- 红花: 3
- 帖子: 149
- 在线: 132.9小时
- 虫号: 1382135
- 注册: 2011-08-28
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
我是大婵子3楼2014-08-21 15:35:26
Jessica_213
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 208.8
- 红花: 1
- 帖子: 46
- 在线: 89.6小时
- 虫号: 2114923
- 注册: 2012-11-08
- 性别: MM
- 专业: 生化分析及生物传感
6楼2014-08-23 19:47:32
bggbg
铁杆木虫 (小有名气)
- BM-EPI: 2
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 5700.3
- 红花: 17
- 帖子: 207
- 在线: 313.5小时
- 虫号: 735714
- 注册: 2009-03-30
- 专业: 金属结构材料
2楼2014-08-05 02:49:26
lucias
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2593.4
- 红花: 3
- 帖子: 149
- 在线: 132.9小时
- 虫号: 1382135
- 注册: 2011-08-28
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
4楼2014-08-21 15:37:29
lucias
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2593.4
- 红花: 3
- 帖子: 149
- 在线: 132.9小时
- 虫号: 1382135
- 注册: 2011-08-28
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
5楼2014-08-21 15:39:32
youlizujuan
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 48.1
- 散金: 35
- 红花: 1
- 帖子: 184
- 在线: 55.9小时
- 虫号: 1352231
- 注册: 2011-07-21
- 性别: MM
- 专业: 生物信息学
7楼2014-09-02 10:29:42
8楼2014-10-25 03:38:37
lucias
木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 2593.4
- 红花: 3
- 帖子: 149
- 在线: 132.9小时
- 虫号: 1382135
- 注册: 2011-08-28
- 性别: GG
- 专业: 分析化学
9楼2014-10-25 12:13:35
1143011626xj
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 78.8
- 散金: 5
- 帖子: 20
- 在线: 16.1小时
- 虫号: 2742362
- 注册: 2013-10-21
- 专业: 凝聚态物性 II ：电子结构
10楼2016-10-25 11:08:45
25