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junrui

新虫 (初入文坛)

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[交流] 巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题，已用离心和加Nacl方法测试已有9人参与

大家好，我最近一直在尝试把巯基修饰的ssDNA链接到13nm的纳米金颗粒上。我先用Ka2CO3将柠三钠还原法制备的13nm纳米金溶液PH值调到9.5左右，加入微量PB稀释的抗体形成不饱和的AU－抗体复合物，静置2小时后直接加入巯基修饰的ssDNA，终浓度约为0.2uM，上摇床4度下12小时后取出。此时如果用1ml枪头反复缓慢吸打，大约几十次后会在枪头处形成如照片中的深黯红色痕迹。

为了检查ssDNA是否的确牢固地与Au连接形成Au-S共价结合，我取样后分成两组进行测试，且保留了一份未加DNA的纳米金(同样加了微量抗体)作为参照，并分别做了离心和加Nacl的对比。

当第一组上离心机10000rpm下10'后，发现无论是否加入DNA，所有的组别的底部都出现黑色聚集无法重悬，同时溶液中也存在有部分呈红色的完好纳米金。这应该表明ssDNA没有成功连接到Au上。
但是我在第二组中快速加入Nacl使终浓度达到0.3M时，发现未加DNA的那一份Au在1分钟内迅速变蓝，1小时左右完全变透明，溶液内有黑色聚集物，管壁上略有黑色吸附(照片中中间的EP管)。毫无疑问这就是Au聚集了的表现。
然而加了DNA的那一份Au溶液一开始没有变化，直到2小时左右，管壁上才开始逐渐出现红色吸附物，8小时后溶液变清，管壁上有大量的红色吸附物，且无法重悬。(照片中最左边的EP管)。所有的EP管都是进口的没有专门做硅化，但是加了DNA与未加DNA的表现有很大差异，这样的话，请教大家究竟ssDNA是成功连接上了Au呢？还是没有成功？有什么更好办法来确保连接成功呢？

谢谢大家了。

照片 (2).JPG

照片 (1).JPG

照片.JPG

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1楼2014-07-26 19:35:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

youlizujuan

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by Jessica_213 at 2014-08-23 19:47:32
之前看有的文献说，如果金纳米表面连上了DNA，会有DNA的特征紫外吸收峰（260nm)。但是我就做出来过一次有这个峰的，很多时候都没有。不过，有一个很简单的方法检测DNA有没有接上去：电泳啊！加DNA和不加DNA的同时电 ...

交流一下不加DNA的裸金是跑不出胶孔吧