24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3385  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

junrui

新虫 (初入文坛)

[交流] 巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题,已用离心和加Nacl方法测试 已有9人参与

大家好,我最近一直在尝试把巯基修饰的ssDNA链接到13nm的纳米金颗粒上。我先用Ka2CO3将柠三钠还原法制备的13nm纳米金溶液PH值调到9.5左右,加入微量PB稀释的抗体形成不饱和的AU-抗体复合物,静置2小时后直接加入巯基修饰的ssDNA,终浓度约为0.2uM,上摇床4度下12小时后取出。此时如果用1ml枪头反复缓慢吸打,大约几十次后会在枪头处形成如照片中的深黯红色痕迹。

为了检查ssDNA是否的确牢固地与Au连接形成Au-S共价结合,我取样后分成两组进行测试,且保留了一份未加DNA的纳米金(同样加了微量抗体)作为参照,并分别做了离心和加Nacl的对比。

当第一组上离心机10000rpm下10'后,发现无论是否加入DNA,所有的组别的底部都出现黑色聚集无法重悬,同时溶液中也存在有部分呈红色的完好纳米金。这应该表明ssDNA没有成功连接到Au上。
但是我在第二组中快速加入Nacl使终浓度达到0.3M时,发现未加DNA的那一份Au在1分钟内迅速变蓝,1小时左右完全变透明,溶液内有黑色聚集物,管壁上略有黑色吸附(照片中中间的EP管)。毫无疑问这就是Au聚集了的表现。
然而加了DNA的那一份Au溶液一开始没有变化,直到2小时左右,管壁上才开始逐渐出现红色吸附物,8小时后溶液变清,管壁上有大量的红色吸附物,且无法重悬。(照片中最左边的EP管)。所有的EP管都是进口的没有专门做硅化,但是加了DNA与未加DNA的表现有很大差异,这样的话,请教大家究竟ssDNA是成功连接上了Au呢?还是没有成功?有什么更好办法来确保连接成功呢?

谢谢大家了。

巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题,已用离心和加Nacl方法测试
照片 (2).JPG


巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题,已用离心和加Nacl方法测试-1
照片 (1).JPG


巯基ssDNA连接纳米金的奇怪问题,已用离心和加Nacl方法测试-2
照片.JPG
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lucias

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
离心清洗时,要用到表面活性剂,溶液无盐,最后再加盐,直接进行下一步实验
5楼2014-08-21 15:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

bggbg

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
likedong1021: 应助指数+1, 感谢回帖交流!该帖被"生物材料版悬而未决问题集锦系列---- 2014年7月"收录,请到本版置顶帖中回帖并粘贴应助地址领币币 2014-08-05 04:01:39
如果知道你采用的ssDNA分子量,为何不跑个电泳看看修饰后的颗粒是否有特征吸收峰,另外楼主的金颗粒粘在管壁上了,说明水溶性在修饰以后变差了,以后应用的时候楼主还得想想办法给他改性
2楼2014-08-05 02:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lucias

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
likedong1021: 感谢回帖交流!该帖被"生物材料版悬而未决问题集锦系列---- 2014年7月"收录,请到本版置顶帖中回帖并粘贴应助地址领币币 2014-08-21 15:43:07
建议金颗粒先用BSPP封闭,然后再接抗体,最后接SH-DNA。问题会迎刃而解!BSPP是个好东西,楼主可以尝试一下!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-08-21 15:35:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lucias

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
此时如果用1ml枪头反复缓慢吸打,大约几十次后会在枪头处形成如照片中的深黯红色痕迹----------六次足够混匀!另外你这枪头质量也不行
4楼2014-08-21 15:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +8 minht 2026-03-29 8/400 2026-03-31 03:32 by 蒙奇奇521
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 01:13 by Ccclqqq
[考研] 070300化学279求调剂 +3 哈哈哈^_^ 2026-03-31 5/250 2026-03-31 01:07 by 拿破龙
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +7 萝卜炖青菜 2026-03-28 8/400 2026-03-30 19:59 by 无际的草原
[考研] 367求调剂 +5 芋泥啵啵… 2026-03-28 5/250 2026-03-30 19:56 by 无际的草原
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +18 Mr. Z 2026-03-25 19/950 2026-03-30 19:01 by Wang200018
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 105500药学求调剂,一志愿山东大学药学,348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +5 兔兔兔111223314 2026-03-29 7/350 2026-03-30 18:29 by 兔兔兔111223314
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +16 李李不服输 2026-03-26 16/800 2026-03-30 17:47 by wangjy2002
[考研] 291求调剂 +8 HanBeiNingZC 2026-03-24 8/400 2026-03-30 17:01 by 无际的草原
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +11 nnnnnnn5 2026-03-25 11/550 2026-03-29 20:42 by 无际的草原
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
信息提示
请填处理意见