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wanglei230

木虫 (小有名气)

PHD


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同时修饰抗体和dna?

发自小木虫IOS客户端
百舸争流奋楫者先
11楼2016-10-31 13:41:03
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templefire

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主其实没说清楚啊。。。为什么修饰的时候要加入抗体呢?是要把抗体修饰到金颗粒上么?还有DNA和抗原的比例是多少啊?光说微量完全没有办法判断到底是哪里出问题了。之前我也做过金颗粒修饰单链DNA的反应,建议的方法是先将DNA加入到没有加buffer的金颗粒溶液中,注意这个时候什么都不要加!过夜之后再加入buffer和0.1 M的氯化钠溶液让DNA上满。这个反应没有那么娇贵,所以不用在反应前调pH,容易把金颗粒弄沉。严重怀疑楼主的聚沉就是这么造成的。

建议楼主好好研究一下C. A. Merkin的工作,印象中他也做过修饰抗体的反应,他也有篇综述专门研究DNA上到金颗粒表面时的形态变化,会对你的实验非常有帮助。
12楼2016-11-02 15:44:47
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我是大婵子

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by lucias at 2014-08-21 15:35:26
建议金颗粒先用BSPP封闭,然后再接抗体,最后接SH-DNA。问题会迎刃而解!BSPP是个好东西,楼主可以尝试一下!

请问,具体是怎样操作的?调PH以后加BSPP(多少合适?需要反应多长时间?),加了抗体和DNA后,要像文献中16小时以后,再加盐老化40小时吗?我看文献中有的要老化40多小时,有的几个小时。求教
13楼2017-03-23 11:38:30
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