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flightprince

铁虫 (初入文坛)

[求助] 分离培养?失败? 已有5人参与

分离内生菌按照然后用70%乙醇浸泡2分钟,再用1%次氯酸钠浸泡3分钟,最后用无菌水冲洗3-4次的方法表面消毒。第一分离很成功,后来分离了两次,每次都做了有一百多平板,基本都不张菌落。培养基是我事先倒好的,在超净台放了有两天。急求啊!!!
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无欲无求
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liuboeo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前分离植物内生菌时,植物表面处理程度比你的还要重,分离的效果还不错,建议你无菌水浸泡下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-07-26 10:04:34
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flightprince

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuboeo at 2014-07-26 10:04:34
以前分离植物内生菌时,植物表面处理程度比你的还要重,分离的效果还不错,建议你无菌水浸泡下

无菌水浸泡三次,每次都在一分钟以上
无欲无求
3楼2014-07-26 11:08:49
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liuboeo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by flightprince at 2014-07-26 11:08:49
无菌水浸泡三次,每次都在一分钟以上...

你是从哪里分离内生菌,植物么?是表面灭菌后粉碎涂布,还是用的其他方法呀?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-07-26 12:37:55
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silence~彤

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能的hi酒精处理的时间太长,究竟脱水脱水严重,我们一般用75%酒精20~30S,然后无菌水洗,再用次氯酸钠处理,在无菌水水洗。
5楼2014-07-26 16:09:05
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flightprince

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liuboeo at 2014-07-26 12:37:55
你是从哪里分离内生菌,植物么?是表面灭菌后粉碎涂布,还是用的其他方法呀?
...

枣果实,表面消毒,取组织块分离
无欲无求
6楼2014-07-26 22:33:36
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flightprince

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by silence~彤 at 2014-07-26 16:09:05
有可能的hi酒精处理的时间太长,究竟脱水脱水严重,我们一般用75%酒精20~30S,然后无菌水洗,再用次氯酸钠处理,在无菌水水洗。

这个消毒的方法,我第一次成功分离出菌了
无欲无求
7楼2014-07-26 22:34:21
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silence~彤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by flightprince at 2014-07-26 22:34:21
这个消毒的方法,我第一次成功分离出菌了...

那就好
8楼2014-07-28 13:03:59
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flightprince

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by silence~彤 at 2014-07-28 13:03:59
那就好...

我第一次分离出菌之后,第二次第三次都失败了
无欲无求
9楼2014-07-28 17:45:13
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liao_jzy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

本人是做植株病害分离的,植株体酒精消毒时间不超过30s,次氯酸钠时间5到8分钟。就基本上可以了,具体时间得看植株组织体具体调整。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
虚心请教,小心做事
10楼2014-07-29 22:51:31
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