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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 分离培养？失败？
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flightprince

铁虫 (初入文坛)

[求助] 分离培养？失败？ 已有5人参与

分离内生菌按照然后用70%乙醇浸泡2分钟，再用1%次氯酸钠浸泡3分钟，最后用无菌水冲洗3-4次的方法表面消毒。第一分离很成功，后来分离了两次，每次都做了有一百多平板，基本都不张菌落。培养基是我事先倒好的，在超净台放了有两天。急求啊！！！
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无欲无求
1楼 2014-07-26 09:52:01
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liuboeo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前分离植物内生菌时，植物表面处理程度比你的还要重，分离的效果还不错，建议你无菌水浸泡下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-07-26 10:04:34
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flightprince

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuboeo at 2014-07-26 10:04:34
以前分离植物内生菌时，植物表面处理程度比你的还要重，分离的效果还不错，建议你无菌水浸泡下

无菌水浸泡三次，每次都在一分钟以上
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无欲无求
3楼2014-07-26 11:08:49
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liuboeo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by flightprince at 2014-07-26 11:08:49
无菌水浸泡三次，每次都在一分钟以上...

你是从哪里分离内生菌，植物么？是表面灭菌后粉碎涂布，还是用的其他方法呀？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-07-26 12:37:55
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silence~彤

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能的hi酒精处理的时间太长，究竟脱水脱水严重，我们一般用75%酒精20~30S，然后无菌水洗，再用次氯酸钠处理，在无菌水水洗。
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5楼2014-07-26 16:09:05
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flightprince

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuboeo at 2014-07-26 12:37:55
你是从哪里分离内生菌，植物么？是表面灭菌后粉碎涂布，还是用的其他方法呀？
...

枣果实，表面消毒，取组织块分离
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无欲无求
6楼2014-07-26 22:33:36
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flightprince

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by silence~彤 at 2014-07-26 16:09:05
有可能的hi酒精处理的时间太长，究竟脱水脱水严重，我们一般用75%酒精20~30S，然后无菌水洗，再用次氯酸钠处理，在无菌水水洗。

这个消毒的方法，我第一次成功分离出菌了
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无欲无求
7楼2014-07-26 22:34:21
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silence~彤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by flightprince at 2014-07-26 22:34:21
这个消毒的方法，我第一次成功分离出菌了...

那就好
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8楼2014-07-28 13:03:59
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flightprince

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by silence~彤 at 2014-07-28 13:03:59
那就好...

我第一次分离出菌之后，第二次第三次都失败了
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无欲无求
9楼2014-07-28 17:45:13
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liao_jzy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

本人是做植株病害分离的，植株体酒精消毒时间不超过30s，次氯酸钠时间5到8分钟。就基本上可以了，具体时间得看植株组织体具体调整。

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虚心请教，小心做事
10楼2014-07-29 22:51:31
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