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protein780铁虫 (小有名气)
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[求助]
内毒素干扰实验，有些不理解，求组各路朋友帮忙解惑。 已有2人参与
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1.药典上说用未检查出内毒素的供试品稀释标准品，我的样品从未做过检测，怎么可能知道是否含有内毒素呢？ 2.我跳过干扰实验直接做凝胶限量实验，发现样品在最大稀释范围与鲎试剂反应时仍未阳性，这个怎么排除是否是因为有干扰增强的因素呢？ 3.抗体类药物在生产时内毒素最大限值是多少呢？有的说10EU/剂量，是这样的吗？ 4.干扰实验的原理是什么呢？“通过比较鲎试剂与内毒素在水溶液和供试品溶液中反应的差异程度，来确定供试品在该浓度下是否对BET检查有干扰”，这一说法，我不太明白，供试品里面肯定会有一部分内毒素的呀，再加入标准品，肯定会增加呈现阳性的概率。 |
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【答案】应助回帖
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protein780: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-25 17:12:05
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protein780: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-25 17:12:05
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1、个人认为，这个“未检查出内毒素的供试品稀释标准品”指的是：在做干扰实验之前，肯定会做相应干扰预实验来确定供试品的合适浓度，而在此浓度下的供试品，用你确定的鲎试剂实验之后是不会有阳性反应的。也就是，此浓度的供试品，内毒素含量应是在你定的限值以内的； 2、你做供试品阳性反应了吗？如果做了，阳性反应不是阳性的话，才能证明你的供试品对结果是有干扰的。你可以检测一下PH值，看是否在合适的PH值范围内，像枸橼酸、组氨酸等等的PH干扰都很大； 3、内毒素限值是根据药典上的公式算出来的，如果觉得药典上的限值过大，可参考同类产品的内毒素限值，个人认为，严格一些是好事。并不是所有的抗体类药物的内毒素限值都是10EU/剂量； 4、这个就是一个回收实验。检查一下你选择的供试品浓度是否对鲎试剂反应无干扰。一般 |
3楼2014-07-25 14:28:04
protein780
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2楼2014-07-25 12:28:16
protein780
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