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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 真菌的干扰试验
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L人生游戏

铜虫 (小有名气)

[求助] 真菌的干扰试验 已有1人参与

最近打算做植物病原真菌的干扰试验，在载体方面和真菌原生质体以及转化方面存在许多疑问和问题，希望各虫友指点指点。
   第一个就是载体的疑问，是不是pCAMBIA系列的载体都是农杆菌转化的啊，之前看了一篇文献，他们是用pCAMBIA3300加上潮霉素抗性，然后构建干扰载体。   但是在转化时是直接转到了真菌的原生质体里，而不是通过农杆菌转化的。这一点我不明白。   还有一个就是农杆菌转化方面，我也查看了不少论坛上的相关信息，农杆菌也有好几种，而且转化方法也不同，有的是农杆菌转，有的说用电转，有的是原生质体转， 不知道用不同的转化方法与试验真菌有关系吗，与农杆菌的菌系有关系吗？   
刚开始接触，希望大家能够积极探讨，有别的问题也可以提出来，共同进步。
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珍惜生命，珍惜时间！
1楼 2014-07-21 14:04:36
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
blessing，呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵呵。
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2楼2014-07-21 14:32:12
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yeschuang

新虫 (初入文坛)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-09-29 11:26:41
先把真菌做成感受态，然后通过醋酸锂，二硫苏糖醇等等作用，把干扰片段整合到真菌基因组中，然后通过抗生素筛选，农杆菌转，电转，只是转进去的方法不同而已。你查查相关文献，照着方法做就可以了。
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3楼2014-09-25 12:20:49
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L人生游戏

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yeschuang at 2014-09-25 12:20:49
先把真菌做成感受态，然后通过醋酸锂，二硫苏糖醇等等作用，把干扰片段整合到真菌基因组中，然后通过抗生素筛选，农杆菌转，电转，只是转进去的方法不同而已。你查查相关文献，照着方法做就可以了。

用RNA沉默载体转化是把RNA干扰的功能区域连同抗性基因一起插入到基因组吗，还是别的方式起作用。
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珍惜生命，珍惜时间！
4楼2014-09-28 14:46:49
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

3300绝对不是用潮霉素的

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-12-01 18:20:33
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