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[求助]
需要做一个测吸光系数的实验,不知道怎么做。求给位指教
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细胞生长在添加了10%FBS和链霉素/青霉素的DMEM培养基中。转染后48小时,使用PH7.2的PBS(磷酸盐缓冲液)清洗3次,在铁摄入缓冲液(IUB: 25 mM MES, 25 mM MOPS, 140 mM NaCl, 5 mM glucose, 5.4 mM KCl, 1.8 mM CaCl2,800M MgCl2),添加50uM Fe3+-NTA or含50uM Cu2+-NTA的 IUB。产生的二价铁使用200uM铁三嗪作为指示剂,检测λ=562nm吸光度增加,对Fe2-ferrozine复合体使用吸光系数(extinction coefficient)27.9 mM-1cm-1。 Cu2变成Cu1造成Cu2的减少通过200M BCS(bathocuprionedisulfonate)作为指示剂,测定482nm的吸光度,对Cu1-BCS complex 使用12.25 mM-1cm-1 吸光系数。 不知道这样实验该用什么仪器做?请问各位有没做过类似的实验,或者有什么单位或公司能做这样的实验,麻烦指教!非常感谢 |
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