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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 菌落图片,求解释~已有6人参与

连接后转化,37度培养12个小时后,出现模糊不清,分不清菌落,朦朦胧胧现象,一片一片的~求解释~是氨苄的问题?培养板的问题?连接转化的问题吗?

菌落图片,求解释~
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czb002

金虫 (正式写手)

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-09 19:36:28
引用回帖:
7楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-07-09 15:33:30
抗生素没有过滤过的,以前也没有的,师姐用都没有问题的...

嗯,可以看得出来,模糊的是卫星杂菌,抗生素过滤或者用新的吧。不是别人用着正常你也可以这么干的,有可能你手法有问题。0.22过滤一下吧,简单的很。
8楼2014-07-09 15:52:37
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
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10楼2014-07-09 21:21:08
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 20:18:35
引用回帖:
18楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-07-11 14:09:56
CK对照?能再详细点吗?做阴性对照,不是用普通LB液体培养基吗?...

这个阴性对照是为了看你在实验的整个操作过程中是否染菌而进行的。就是你拿出一管感受态之后,比如说,你的一管感受态是200微升,你拿一个灭过菌的EP管,从这个感受态中分出40微升,然后这就是两管感受态了。你把质粒加入到160微升的那管感受态中,然后另一管40微升的感受态什么都不加,而后就按照protocol同时操作两管。最后涂到抗性平板上。第二天,没加质粒的那一管,在抗性平板上应该肯定不长,而另一管由于转入质粒,在抗性平板上肯定有单菌落。如果另一个没转质粒的也长了,你就可以从两个方面去找原因,一个是感受态染菌,还有一个是你倒平板时,可能培养基太热导致抗生素失效,而使没有转入抗性质粒的大肠杆菌也能生长。

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23楼2014-07-11 15:20:58
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yaolinlshang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-07-11 14:08:29
烘箱里 验菌??是平板正置,盖上盖子,30度烘吗?...

我们是倒置的啊,温度没有太多的要求,与你要培养的菌的温度一致即可。
最是人间留不住,朱颜辞镜花辞树!
24楼2014-07-14 09:44:23
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czb002

金虫 (正式写手)

抗生素没过滤吧?

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2楼2014-07-09 15:19:08
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-09 19:36:18
如果是抗生素问题,你可是重新涂板;如果抗生素没问题,那就是你涂菌的浓度太高了,可是稀释一下

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青山不断,绿水长流
3楼2014-07-09 15:20:59
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-09 19:36:22
还有抗生素容易失活,你制培养基时有可能温度太高失活;菌培养也不要太长,否则抗生素也会失活。

[ 发自小木虫客户端 ]
青山不断,绿水长流
4楼2014-07-09 15:23:02
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-07-09 15:23:02
还有抗生素容易失活,你制培养基时有可能温度太高失活;菌培养也不要太长,否则抗生素也会失活。

应该不是温度太高的问题,因为我把培养基拧紧瓶口后,在水浴锅里冷却到55度的,30min后才加抗生素的。。
5楼2014-07-09 15:31:16
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-07-09 15:20:59
如果是抗生素问题,你可是重新涂板;如果抗生素没问题,那就是你涂菌的浓度太高了,可是稀释一下

涂菌密度高应该不会出现模糊不清,朦朦胧胧似杂菌的现象吧,密度高应该只会菌落密点而已。。
6楼2014-07-09 15:32:25
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czb002 at 2014-07-09 15:19:08
抗生素没过滤吧?

抗生素没有过滤过的,以前也没有的,师姐用都没有问题的
7楼2014-07-09 15:33:30
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by czb002 at 2014-07-09 15:52:37
嗯,可以看得出来,模糊的是卫星杂菌,抗生素过滤或者用新的吧。不是别人用着正常你也可以这么干的,有可能你手法有问题。0.22过滤一下吧,简单的很。...

好的,谢谢~
9楼2014-07-09 16:37:03
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