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永远一片天

新虫 (正式写手)

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[求助] 菌落图片，求解释~已有6人参与

连接后转化，37度培养12个小时后，出现模糊不清，分不清菌落，朦朦胧胧现象，一片一片的~求解释~是氨苄的问题？培养板的问题？连接转化的问题吗？

PIC_20140709_132454_DC9.jpg

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1楼2014-07-09 15:09:04

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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

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专业: 微生物生理与生物化学

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 20:18:35

引用回帖:

18楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-07-11 14:09:56
CK对照？能再详细点吗？做阴性对照，不是用普通LB液体培养基吗？...

这个阴性对照是为了看你在实验的整个操作过程中是否染菌而进行的。就是你拿出一管感受态之后，比如说，你的一管感受态是200微升，你拿一个灭过菌的EP管，从这个感受态中分出40微升，然后这就是两管感受态了。你把质粒加入到160微升的那管感受态中，然后另一管40微升的感受态什么都不加，而后就按照protocol同时操作两管。最后涂到抗性平板上。第二天，没加质粒的那一管，在抗性平板上应该肯定不长，而另一管由于转入质粒，在抗性平板上肯定有单菌落。如果另一个没转质粒的也长了，你就可以从两个方面去找原因，一个是感受态染菌，还有一个是你倒平板时，可能培养基太热导致抗生素失效，而使没有转入抗性质粒的大肠杆菌也能生长。