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David_wyq

金虫 (小有名气)

[求助] 无机磷解磷菌筛选 已有5人参与

大家好,我刚开始做研究生课题,主要是对无机磷解磷菌进行筛选,不过配无机磷培养基怎么都配不好,即使上面长菌了,也看不见所谓的解磷圈,不知道是培养基的问题还是我压根没筛选到菌?请求大家帮帮忙,谢谢!!!
我培养基配方跟文献里的都一样,都是用Ca3(PO4)2做磷源筛选解磷菌,只不过配培养基的过程有点疑问,我是调好ph,再加琼脂,再加入研磨好的磷酸钙灭菌,然后倒板,可是每次倒板都会部分培养基有磷酸钙成块,沉淀于培养皿底部,而不是均匀的分布于培养基中。有说应该少到一点培养基,薄一点就可以方便微生物解磷观察解磷圈,可是如果到的太薄,时间长了培养基就干了,求解释,希望各位大侠帮我给出解释,如果能附上您的具体方法和图片,吾将万分感激,必有重谢!
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463705812

银虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by David_wyq at 2014-04-14 10:42:27
我们买的也是粉末啊,只不过加热灭菌后在液体条件下就部分结块了。请问那你们怎么做的啊?你能把流程告诉我么?谢谢,我就是想把无机磷培养基配出来,好筛选解磷菌,谢谢。开头难死了,...

那个我不是筛!我是看我的菌有没有解磷效果!我也是你那种情况!不过我在倒平板以前用力的摇!没泡沫后倒的平板!里面的粉末还算比较均匀的!没什么大的颗粒!有2个板有,但我没用就是了!感觉要是有效果的话能看的出来的!
我能!
17楼2014-04-14 19:02:16
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普通回帖

laogong10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2014-04-10 17:13:06
到的时候一定要等温度降到40度左右,每个平板倒之前,培养基要摇匀,倒到平板后很快就凝固,这样倒出来的就很均匀。
2楼2014-04-10 16:54:04
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David_wyq

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-10 16:54:04
到的时候一定要等温度降到40度左右,每个平板倒之前,培养基要摇匀,倒到平板后很快就凝固,这样倒出来的就很均匀。

谢谢,可是我这个不是培养基不均匀,而是培养基中的磷酸钙分布不均匀,磷酸钙成块 ,沉淀在底部的问题
读万卷书不如行万里路,行万里路不如阅人无数,阅人无数不如名师指路。
3楼2014-04-11 08:09:30
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mashuge

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
David_wyq: 金币+2, 有帮助 2014-04-28 07:55:56
我记得论坛 中有人问过这个问题的,主要提到两种方法。1是混菌倾注法,在40℃的将菌液导入培养基中混匀后再到平板,2是双层法,下面一层用适合你的菌生长的培养基,倒好后加菌液涂布均匀后,让菌液伸进去就是平板看不到水渍了,待你的上层温度到40~50℃是倒平板。
珍惜自己现在拥有的,别等失去才追悔莫及,人只有经历了才会懂才会成熟,加油,未来的日子好好过!
4楼2014-04-11 10:43:37
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David_wyq

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mashuge at 2014-04-11 10:43:37
我记得论坛 中有人问过这个问题的,主要提到两种方法。1是混菌倾注法,在40℃的将菌液导入培养基中混匀后再到平板,2是双层法,下面一层用适合你的菌生长的培养基,倒好后加菌液涂布均匀后,让菌液伸进去就是平板看 ...

谢谢你,我看见之前的那个问题以及回复了,但之前的答案并没有明确的解决我遇到的问题,我的主要问题还是配制无机磷培养基的问题,我感觉这个问题也是我培养的菌长不出溶磷圈的原因,就是磷酸钙没分布均匀,即使是粉末状加入培养基中,灭好后也成块沉淀,一是感觉菌无法充分与磷酸钙接触分解无机磷,二是不利于平板观察,我也试过使劲摇尽量混匀再倒板,能看见颗粒状白色粉末在培养基中,但是张出来的菌还是看不到解磷圈,不知道为什么?如果您了解相关的或者做相关的可以其他方式联系,谢谢
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5楼2014-04-11 11:07:27
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pH酸性。保证其他氮源中无磷,比如不使用酵母粉等含有有机磷的成分。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
6楼2014-04-11 13:43:22
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laogong10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dllchina: 金币+2, 鼓励新虫发帖 2014-04-11 16:49:22
David_wyq: 金币+2, 有帮助 2014-04-28 07:56:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by David_wyq at 2014-04-11 08:09:30
谢谢,可是我这个不是培养基不均匀,而是培养基中的磷酸钙分布不均匀,磷酸钙成块 ,沉淀在底部的问题...

磷酸钙先要研成细粉后才能加入的,这样就均匀些,
7楼2014-04-11 16:47:11
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David_wyq

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-11 16:47:11
磷酸钙先要研成细粉后才能加入的,这样就均匀些,...

您好,我就是把 磷酸钙研磨好在加入培养基中的啊?不过是灭菌之前加入,灭菌之后就沉下去结块了,然后再怎么摇也分不开,就是成块成片沉淀在培养基底部,所以倒平板的时候就倒不好,谢谢你,
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8楼2014-04-11 19:51:35
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David_wyq

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dhd997 at 2014-04-11 13:43:22
pH酸性。保证其他氮源中无磷,比如不使用酵母粉等含有有机磷的成分。

我的培养基不含有酵母粉啊,就是无机磷培养基,配方是葡萄糖为碳源,之后就是一些微量元素,磷源就是磷酸钙啊,而且配方上写着ph是7.0到7.5啊?
读万卷书不如行万里路,行万里路不如阅人无数,阅人无数不如名师指路。
9楼2014-04-11 19:53:30
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463705812

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-11 16:47:11
磷酸钙先要研成细粉后才能加入的,这样就均匀些,...

我们实验室买回来的磷酸钙就是粉末状的啊
我能!
10楼2014-04-13 17:33:03
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