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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 无机磷解磷菌筛选
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David_wyq

金虫 (小有名气)

[求助] 无机磷解磷菌筛选 已有5人参与

大家好，我刚开始做研究生课题，主要是对无机磷解磷菌进行筛选，不过配无机磷培养基怎么都配不好，即使上面长菌了，也看不见所谓的解磷圈，不知道是培养基的问题还是我压根没筛选到菌？请求大家帮帮忙，谢谢！！！
我培养基配方跟文献里的都一样，都是用Ca3(PO4)2做磷源筛选解磷菌，只不过配培养基的过程有点疑问，我是调好ph，再加琼脂，再加入研磨好的磷酸钙灭菌，然后倒板，可是每次倒板都会部分培养基有磷酸钙成块，沉淀于培养皿底部，而不是均匀的分布于培养基中。有说应该少到一点培养基，薄一点就可以方便微生物解磷观察解磷圈，可是如果到的太薄，时间长了培养基就干了，求解释，希望各位大侠帮我给出解释，如果能附上您的具体方法和图片，吾将万分感激，必有重谢！
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读万卷书不如行万里路，行万里路不如阅人无数，阅人无数不如名师指路。
1楼 2014-04-10 12:52:17
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463705812

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by David_wyq at 2014-04-14 10:42:27
我们买的也是粉末啊，只不过加热灭菌后在液体条件下就部分结块了。请问那你们怎么做的啊？你能把流程告诉我么？谢谢，我就是想把无机磷培养基配出来，好筛选解磷菌，谢谢。开头难死了，...

那个我不是筛！我是看我的菌有没有解磷效果！我也是你那种情况！不过我在倒平板以前用力的摇！没泡沫后倒的平板！里面的粉末还算比较均匀的！没什么大的颗粒！有2个板有，但我没用就是了！感觉要是有效果的话能看的出来的！
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我能！
17楼2014-04-14 19:02:16
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laogong10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+3, 鼓励新虫 2014-04-10 17:13:06
到的时候一定要等温度降到40度左右，每个平板倒之前，培养基要摇匀，倒到平板后很快就凝固，这样倒出来的就很均匀。
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2楼2014-04-10 16:54:04
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David_wyq

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-10 16:54:04
到的时候一定要等温度降到40度左右，每个平板倒之前，培养基要摇匀，倒到平板后很快就凝固，这样倒出来的就很均匀。

谢谢，可是我这个不是培养基不均匀，而是培养基中的磷酸钙分布不均匀，磷酸钙成块 ，沉淀在底部的问题
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3楼2014-04-11 08:09:30
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mashuge

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
David_wyq: 金币+2, ★有帮助 2014-04-28 07:55:56
我记得论坛 中有人问过这个问题的，主要提到两种方法。1是混菌倾注法，在40℃的将菌液导入培养基中混匀后再到平板，2是双层法，下面一层用适合你的菌生长的培养基，倒好后加菌液涂布均匀后，让菌液伸进去就是平板看不到水渍了，待你的上层温度到40~50℃是倒平板。
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珍惜自己现在拥有的，别等失去才追悔莫及，人只有经历了才会懂才会成熟，加油，未来的日子好好过！
4楼2014-04-11 10:43:37
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David_wyq

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mashuge at 2014-04-11 10:43:37
我记得论坛 中有人问过这个问题的，主要提到两种方法。1是混菌倾注法，在40℃的将菌液导入培养基中混匀后再到平板，2是双层法，下面一层用适合你的菌生长的培养基，倒好后加菌液涂布均匀后，让菌液伸进去就是平板看 ...

谢谢你，我看见之前的那个问题以及回复了，但之前的答案并没有明确的解决我遇到的问题，我的主要问题还是配制无机磷培养基的问题，我感觉这个问题也是我培养的菌长不出溶磷圈的原因，就是磷酸钙没分布均匀，即使是粉末状加入培养基中，灭好后也成块沉淀，一是感觉菌无法充分与磷酸钙接触分解无机磷，二是不利于平板观察，我也试过使劲摇尽量混匀再倒板，能看见颗粒状白色粉末在培养基中，但是张出来的菌还是看不到解磷圈，不知道为什么？如果您了解相关的或者做相关的可以其他方式联系，谢谢
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5楼2014-04-11 11:07:27
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主

【答案】应助回帖

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pH酸性。保证其他氮源中无磷，比如不使用酵母粉等含有有机磷的成分。
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
6楼2014-04-11 13:43:22
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laogong10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
dllchina: 金币+2, 鼓励新虫发帖 2014-04-11 16:49:22
David_wyq: 金币+2, ★有帮助 2014-04-28 07:56:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by David_wyq at 2014-04-11 08:09:30
谢谢，可是我这个不是培养基不均匀，而是培养基中的磷酸钙分布不均匀，磷酸钙成块 ，沉淀在底部的问题...

磷酸钙先要研成细粉后才能加入的，这样就均匀些，
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7楼2014-04-11 16:47:11
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David_wyq

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-11 16:47:11
磷酸钙先要研成细粉后才能加入的，这样就均匀些，...

您好，我就是把 磷酸钙研磨好在加入培养基中的啊？不过是灭菌之前加入，灭菌之后就沉下去结块了，然后再怎么摇也分不开，就是成块成片沉淀在培养基底部，所以倒平板的时候就倒不好，谢谢你，
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8楼2014-04-11 19:51:35
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David_wyq

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dhd997 at 2014-04-11 13:43:22
pH酸性。保证其他氮源中无磷，比如不使用酵母粉等含有有机磷的成分。

我的培养基不含有酵母粉啊，就是无机磷培养基，配方是葡萄糖为碳源，之后就是一些微量元素，磷源就是磷酸钙啊，而且配方上写着ph是7.0到7.5啊？
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读万卷书不如行万里路，行万里路不如阅人无数，阅人无数不如名师指路。
9楼2014-04-11 19:53:30
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463705812

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by laogong10000 at 2014-04-11 16:47:11
磷酸钙先要研成细粉后才能加入的，这样就均匀些，...

我们实验室买回来的磷酸钙就是粉末状的啊
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我能！
10楼2014-04-13 17:33:03
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