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lavender_12

新虫 (正式写手)

[求助] HPLC 柱效变差 已有3人参与

我们用的天美的HPLC,LC-2030 UV detector and a SunfireTM C18 column。
但是前一段时间压力升到很高,有200多。然后我们把柱子的进样端和出样端拆开,将滤头超声了一下。
然后现在用甲醇冲洗,压力可以降到70以下。然后换上甲醇:水=3:7的流动相,此时压力先是升到200多一点,
大概是207,然后等基线走平,压力差不多会降到180多。然后我进了样品(丙烯腈水溶液),发现,峰形很差,
而且是分为2个峰(见附件中图片 “异常” )。而之前仪器正常的时候,换上甲醇:水=3:7的流动相,此时压力是从0
升到150多,然后就稳定了,而不是像现在这样先升到很高,然后又降下来。正常时的图片见附件 “正常”,峰位置在
2.805min附近。

您知道仪器的问题出在哪儿吗?可能是柱效变差了,我该怎么解决?暂时还不想买新柱子,想看看能不能修好。

HPLC 柱效变差
异常.JPG


HPLC 柱效变差-1
正常.JPG
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lavender_12: 金币+2, 有帮助, 说明书早都不知道搞哪儿去了,前面用的人都毕业走了。一般应该如何活化? 2014-06-26 13:49:38
lavender_12: 金币+1, 有帮助, 除了反冲洗。我用纯甲醇逐渐增加流量冲洗,用5%的甲醇水逐渐增加流量冲洗,我还超声过筛板。还有什么办法我可以用的? 2014-06-30 17:49:01
色谱柱是不能超声的,另外资料上或者色谱柱说明书上有活化方法,试着活化下色谱柱就行。
4楼2014-06-26 13:43:36
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刘东磊

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lavender_12: 金币+5, 有帮助, 我只是把柱子的滤头取下来超声了, 2014-06-26 11:05:47
lavender_12: 金币+1, 有帮助, 填料塌泄为何会出双峰 2014-06-26 11:06:11
你把柱子超声了,有可能会照成填料塌泄,会出双峰。
以前碰到过预祝超声后,出现双峰,更换新的后就没事了。建议换根柱子试试。
2楼2014-06-26 10:24:14
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刘东磊

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖


lavender_12: 金币+1, 有帮助, 除了换一个柱子还有别的法儿吗? 2014-06-26 13:50:19
填料塌泄,柱就有空隙了,会出双峰。你前面提到压强有变化,还有柱子可能被污染了。双峰还可能因为柱头有孔隙引起的。
3楼2014-06-26 11:14:42
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
怎么可以超声呢?还是换一下柱子吧,为了实验。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
5楼2014-06-27 09:59:18
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