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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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陶陶小子

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC高手请进 已有20人参与

各位大虾,小弟我遇到一问题,请帮忙研究下!
由于我们实验室的液相仪比较古老,流动相需要手工配制。前几天摸索出一流动相的比例,而这几天用相同比例的流动相时,发现出峰时间提前2-3分钟左右,后来又重新配置一相同比例的流动相,比前者又提前半分钟左右,而且发现两峰的分离度也变差了。请问这是什么情况。柱子是刚买的。
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apple04

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
柱温相同吗?
有没有恒温箱啊?
没有的话,柱温也就是室温,
室温不同就会影响出峰时间。
2楼2010-04-21 10:37:23
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yuzhen719

木虫 (正式写手)


xiaodu2007693(金币+1):谢谢交流,说得很对,建议各自滤完再混合测密度 2010-04-21 11:03
流动相配好后过滤还是各自过滤后在混匀配制?
有时流动相配好后过滤,在过滤时有机相可能会被抽走,因此导致每次出峰时间的差别
3楼2010-04-21 10:59:14
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陶陶小子

银虫 (小有名气)

是配好后过滤的。因为要加十二烷基硫酸钠固体溶解的。
好好实验,安全毕业,快速闪人
4楼2010-04-21 12:25:07
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陶陶小子

银虫 (小有名气)

对了,如果流动相在过滤时流失的话,应该延迟出峰啊。
好好实验,安全毕业,快速闪人
5楼2010-04-21 12:26:12
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zhaoxingw1

金虫 (小有名气)


wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-04-21 13:00
我觉得柱温的影响不大,因为时间间隔不大
可能是洗脱液之前柱子没有预先平衡,或者说是平衡时间不同
6楼2010-04-21 12:34:07
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cninfe

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-04-21 13:04
酸性可以影响出峰时间,适当的调节一下PH值。或者有机相比例该小些,
7楼2010-04-21 13:03:17
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kunpenghai

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时流动相配置体积大重现性不好
溶剂挥发的量不同
乙腈或甲醇的量多一滴保留时间可能提前一分钟
8楼2010-04-21 13:19:34
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随风zsm

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-04-21 13:59
流动相配比一定的情况下,过滤与否可能影响流动相极性;此外,柱温影响会较大,笔者曾经碰见过早上色谱峰分离度较好,但中午时段分离度明显变差的情况
9楼2010-04-21 13:44:05
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陶陶小子

银虫 (小有名气)

没有柱温箱。因为是做药物的质量分析,所以柱子,流动相,流速都是按照药典要求。流动相的ph=2.45左右,流速2ml/min,温度就是室温。是不是,流速太大或ph,导致柱效降低
好好实验,安全毕业,快速闪人
10楼2010-04-21 14:35:44
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