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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 怎样测定氨基酸的溶解度？
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wen530

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[求助] 怎样测定氨基酸的溶解度？ 已有2人参与

各位前辈，怎样测定20中基本氨基酸的溶解度？采用什么方法，具体步骤方便告知吗？
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1楼 2014-06-25 17:48:36
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HarveyWang

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海外行者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨基酸的溶解情形，非常复杂，特别容易受 水溶液pH 和 温度的影响。


可以这样自己估算：

1）选定实验保温的温度，已知的缓冲液，或者纯水。 这决定于你做实验的目的。

2）体积可以用20或50 mL，方便在洁净的三角烧瓶摇晃溶解。

3）氨基酸固体采用100或200 mg/次称量，加入上述溶液中，摇动30分钟，看溶解情况。

直到肉眼看到出现不溶解的固体。记下加入的固体量，就是最大溶解度。

4）步骤3）的单次加入量可以根据溶解度大小自己微调。
例如甘氨酸溶解度很大，你就需要用2 g每次来进行测试。
而酪氨酸溶解度很小，你就需要用50 mg每次来进行溶解。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2014-06-26 05:35:32
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wen530

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引用回帖:
2楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-26 05:35:32
氨基酸的溶解情形，非常复杂，特别容易受 水溶液pH 和 温度的影响。


可以这样自己估算：

1）选定实验保温的温度，已知的缓冲液，或者纯水。 这决定于你做实验的目的。

2）体积可以用20或50 mL，方便在洁 ...

可是，没有更精确一点的方法吗？
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3楼2014-06-26 22:37:05
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HarveyWang

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海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wen530: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-06-27 19:27:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by wen530 at 2014-06-26 22:37:05
可是，没有更精确一点的方法吗？...

满足实验需要即可，你要多精确？
这种方法就可以给出2.50+-0.10 g/L的数据，还不够吗?

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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2014-06-26 23:18:12
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环境增值联盟

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2014化学生物学与一氧化氮（NO）国际会议      大会官网：http://broadway.sjtu.edu.cn，2014年7月4-6日，上海。议题：化学生物学、NO、组学（NO仅为议题中的三分之一）。诺贝尔医学奖获得者Ferid Murad教授担任大会名誉主席，科技部原副部长程津培院士担任大会主席。
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5楼2014-06-27 11:23:44
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wen530

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引用回帖:
4楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-26 23:18:12
满足实验需要即可，你要多精确？
这种方法就可以给出2.50+-0.10 g/L的数据，还不够吗?
...

其实，我想问的是怎样测定20中基本氨基酸的含量？
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6楼2014-06-27 19:27:43
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HarveyWang

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6楼: Originally posted by wen530 at 2014-06-27 19:27:43
其实，我想问的是怎样测定20中基本氨基酸的含量？...

你说的是游离氨基酸吧。

1. 氨基酸分析仪。

2. HPLC。  氨基酸需要衍生，文献数百篇。 你查CNKI，多得是。
其中， Waters 的衍生试剂盒和HPLC氨基酸柱，这个最灵敏。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
7楼2014-06-27 20:32:47
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wen530

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引用回帖:
7楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-27 20:32:47
你说的是游离氨基酸吧。

1. 氨基酸分析仪。

2. HPLC。  氨基酸需要衍生，文献数百篇。 你查CNKI，多得是。
其中， Waters 的衍生试剂盒和HPLC氨基酸柱，这个最灵敏。...

如果不采用HPLC，茚三酮这个方法应该普遍适用于各种氨基酸吧？
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8楼2014-06-27 21:50:00
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HarveyWang

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引用回帖:
8楼: Originally posted by wen530 at 2014-06-27 21:50:00
如果不采用HPLC，茚三酮这个方法应该普遍适用于各种氨基酸吧？...

不行。不准。
只能同时测一种，不能测混合样。每一种都要做单独的标线。

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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2014-06-27 22:20:29
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wen530

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9楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-27 22:20:29
不行。不准。
只能同时测一种，不能测混合样。每一种都要做单独的标线。
...

我测定的不是混合样品，而是单个的氨基酸。如果每个氨基酸分别做标准曲线，还不准吗？
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10楼2014-06-28 08:59:52
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