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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助酵母双杂交实验
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李小同

木虫 (小有名气)

[求助] 求助酵母双杂交实验已有2人参与

酵母双杂交建库的时候，clonetech的说明书上要求将15ml菌液涂布在100个平板上，每个平板涂150ul菌液，这个工作量也太大了。我想咨询一下做过酵母双杂交的虫友，这一步的时候可不可以少涂一些板子，比如说每个板子涂150ul，只涂20个平板，剩下的菌液就不要了。因为我本身也不需要这么大的库容量。希望能得到回复，谢谢大家。
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1楼2014-06-23 11:11:24
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qinyy

新虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-07-15 22:02:47
还是要 涂那么多的……文库构建的好坏直接决定你后面 筛选的结果。我够了两个CDNA文库  一般涂 90--100个。 不然你后面帅选很痛苦的，
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5楼2014-07-02 16:00:12
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
李小同: 金币+5, ★有帮助 2014-06-23 14:04:14
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 22:02:53
走捷径，你试试，你运气好会遇到的，反正我是没那么好的运气的，老老实实筛吧，这点不算工作量啦，后面的累活还多着呢。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-06-23 11:29:14
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
李小同: 金币+5, ★有帮助 2014-06-23 14:04:19
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 22:02:38
这个工作量不算很多啦，想想我做过的那些机械重复的工作，说出来都是泪啊。做不做这么多选择在你，只能说按照概率来说涂得越多筛选出来的可能性越大，当然也很运气有关系。我两个师姐当年筛突变体，基本相同的操作，一个筛了一个月，一个筛了大半年。看运气吧！
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3楼2014-06-23 14:00:42
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yangfanv

铁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-23 18:31:38
楼主还是老老实实涂板吧～酵母双杂的目的也是为了筛选到有价值的蛋白相互作用因子～你如果涂的较少的话～可能你就会丢失你本来可得到的信息～～那样你实验都做了但是却做了无用功～费力不讨好～～
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路要慢慢地走～但不能停
4楼2014-06-23 14:40:09
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