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李小同

木虫 (小有名气)

[求助] 求助酵母双杂交实验 已有2人参与

酵母双杂交建库的时候,clonetech的说明书上要求将15ml菌液涂布在100个平板上,每个平板涂150ul菌液,这个工作量也太大了。我想咨询一下做过酵母双杂交的虫友,这一步的时候可不可以少涂一些板子,比如说每个板子涂150ul,只涂20个平板,剩下的菌液就不要了。因为我本身也不需要这么大的库容量。希望能得到回复,谢谢大家。
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yangfanv

铁虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-23 18:31:38
楼主还是老老实实涂板吧~酵母双杂的目的也是为了筛选到有价值的蛋白相互作用因子~你如果涂的较少的话~可能你就会丢失你本来可得到的信息~~那样你实验都做了但是却做了无用功~费力不讨好~~
路要慢慢地走~但不能停
4楼2014-06-23 14:40:09
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
李小同: 金币+5, 有帮助 2014-06-23 14:04:14
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 22:02:53
走捷径,你试试,你运气好会遇到的,反正我是没那么好的运气的,老老实实筛吧,这点不算工作量啦,后面的累活还多着呢。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-23 11:29:14
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
李小同: 金币+5, 有帮助 2014-06-23 14:04:19
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 22:02:38
这个工作量不算很多啦,想想我做过的那些机械重复的工作,说出来都是泪啊。做不做这么多选择在你,只能说按照概率来说涂得越多筛选出来的可能性越大,当然也很运气有关系。我两个师姐当年筛突变体,基本相同的操作,一个筛了一个月,一个筛了大半年。看运气吧!
3楼2014-06-23 14:00:42
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qinyy

新虫 (初入文坛)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2014-07-15 22:02:47
还是要 涂那么多的……文库构建的好坏直接决定你后面 筛选的结果。我够了两个CDNA文库  一般涂 90--100个。 不然你后面帅选很痛苦的,
5楼2014-07-02 16:00:12
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