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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » Red重组时候为什么会出现两条条带？
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luna跃儿弯弯

新虫 (小有名气)

[求助] Red重组时候为什么会出现两条条带？ 已有2人参与

各位师兄师姐，我在做大肠杆菌的一个Red重组实验，敲除的目的基因是2400bp，用KANA作为抗性筛选，当目的基因与KANA抗性基因重组时，做菌落PCR，发现目的基因和KANA抗性基因条带都出现了，这是怎么回事？我接下来该如何处理呢？谢谢师兄师姐指点！不胜感激！
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1楼 2014-06-15 23:04:57
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luna跃儿弯弯

新虫 (小有名气)
跪求~~谁能帮帮忙啊~~
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2楼2014-06-16 09:22:07
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沁荃

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个是因为菌落不纯，你再挑取这个菌落划线，得到的单克隆在PCR鉴定一下应该就不会有了~
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3楼2014-06-25 14:07:49
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summermio

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
luna跃儿弯弯(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:52:54
我遇到过相同的问题， 并且划取单菌落也无法解决。
鉴于检测引物应该没问题的话， 应该是在重组过程中发生了单交换，建议楼主不用再花心思解决了，还是继续做重组筛菌落比较靠谱
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4楼2014-07-23 22:21:55
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